[发明专利]一种松香基功能高分子固定化淀粉酶及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种松香基功能高分子固定化淀粉酶及其制备方法，更具体地说本发明是马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物固定化淀粉酶及其制备方法。

背景技术

酶作为一种生物催化剂，具有催化效率高、专一性强、反应条件温和、可生物降解不会引起环境污染等优点；但是酶对环境影响十分敏感，各种化学、物理和生物因素(包括温度、压力、有机溶剂、离子强度、PH等)都可以使酶丧失生物活性。因此固定化酶的研究受到重视，固定化酶既具有催化特性，有具有能回收，反复使用等优点，并且生产工艺可以连续化、自动化。自从1916年Nelson和Griffin利用活性炭吸附蔗糖酶、1969年成功运用固定化酰化氨基酸水解酶生产L-氨基酸以来，固定化酶由于其良好的理化性质越来越广泛深入，目前常用的固定化酶方法有四种，吸附法、包埋法、共价键结合法及交联法，马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物及马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物固定化淀粉酶的制备方法到目前为止未见文献报导。

发明内容

本发明的目的是提供一种原料易得，价格低廉、具有合适的刚性和较好的机械稳定性，以共价键固定的一种松香基功能高分子固定化淀粉酶及其制备方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案是：

1.一种松香基功能高分子固定化淀粉酶：

1)该松香基功能高分子固定化淀粉酶的化学名称是：马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物固定化淀粉酶；

2)该松香基功能高分子固定化淀粉酶的特点是：1克马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物以共价键固定0.1～0.2g淀粉酶，固定化酶的活性为20～30mg.g^-1.5min^-1，重复使用13次后剩余活性不低于6mg.g^-1.5min^-1，相对保留活性不低于20％；

3)该松香基功能高分子固定化淀粉酶的制备方法，具体步骤如下：

(1)用环己烷浸泡马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物20～24h，过滤，放置在三颈瓶中，加入环己烷作溶剂，共聚物与环己烷的质量比为1∶2～20，用恒压漏斗缓慢的向三颈瓶中加入SOCl₂，共聚物与SOCl₂质量比为1∶1～10，搅拌，约1h滴完，加热升温，温度控制在75～80℃，回流5～8h，反应结束后，改蒸馏装置，蒸出多余的SOCl₂和环己烷，得到酰化树脂，最后用环己烷洗涤酰化树脂3次；

(2)向盛放酰化树脂的三颈瓶中分别加入环己烷和淀粉酶溶液，用磁力搅拌搅动溶液5～12h，整个过程中要在干燥条件下操作；洗涤，抽滤树脂，得到马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物固定化淀粉酶。

2.一种松香基功能高分子固定化淀粉酶的制备方法，是以马来松香乙二醇丙烯酯-丙烯酸共聚物为载体，以淀粉酶为原料，以环己烷作溶剂，SOCl₂作酰化剂，将马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物酰化成酰化树脂，再与淀粉酶反应得到本发明一种松香基功能高分子固定化淀粉酶，即马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物固定化淀粉酶，具体步骤如下：

1)用环己烷浸泡马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物20～24h，过滤，放置在三颈瓶中，加入环己烷作溶剂，共聚物与环己烷的质量比为1∶2～20，用恒压漏斗缓慢的向三颈瓶中加入SOCl₂，共聚物与SOCl₂质量比为1∶1～10，搅拌，约1h滴完，加热升温，温度控制在75～80℃，回流5～8h，反应结束后，改蒸馏装置，蒸出多余的SOCl₂和环己烷，得到酰化树脂，最后用环己烷洗涤酰化树脂3次；

2)向盛放酰化树脂的三颈瓶中分别加入环己烷和淀粉酶溶液，用磁力搅拌搅动溶液5～12h，整个过程中要在干燥条件下操作；洗涤，抽滤树脂，得到马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物固定化淀粉酶。

本发明与现有技术比较具有经下优点：

1.马来松香乙二醇丙烯酸酯含三元环菲骨架，具有合适的刚性，得到的马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物具有较好的机械稳定性；

2.制得马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物固定化淀粉酶是通过共价健固定，牢固；

3.原料易得，价格低廉，有应用前景，本发明固定化淀粉酶可用于催化淀粉水解生成糊精和还原糖，在食品、轻工和医药领域应用广泛。

附图说明

图1是马来松香乙二醇丙烯酸酯-丙烯酸共聚物的红外光谱谱图；