[发明专利]结核及耐药结核的个性化卵黄多克隆抗体制剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种结核及耐药结核的个性化卵黄多克隆抗体制剂，其特征是：它是由从结核患者的血清或痰中分离、培养出致病的结核或耐药结核杆菌，经0.4％甲醛灭活，制成针对该病人及该致病结核杆菌的个性化疫苗，注射到健康产卵的雌禽体内，经此个性化免疫后，取卵黄，经除菌、分离提取、纯化得到针对该患者及针对该致病结核杆菌的个性化、特异性多克隆IgY制剂或将含多种结核及耐药结核的特异性多克隆IgY抗体制剂按等比例混合，制成复合型特异性多克隆IgY抗体制剂。

2.根据权利要求1所述制剂的制备方法，其特征是：制备方法包括如下步骤：

(1)个性化免疫：

A.取结核患者或耐药结核患者的血清或痰，培养致病结核杆菌，0.4％甲醛灭活，制成针对该患者以及针对该致病结核杆菌的个性化疫苗；

B.雌禽适应性饲养，正常产卵一周后，将步骤A制成的个性化疫苗以10～1000μg的抗原量进行免疫，加弗式佐剂，每次0.5mL，皮下或肌肉注射，每7天免疫一次，免疫2～4次，一般抗结核或耐药结核的特异性lgY抗体在第一次免疫14天后出现，收集卵蛋，4℃保存，隔30天可加强免疫一次；

C.采用步骤B个性化疫苗免疫后的卵蛋，得到针对该患者及该致病结核杆菌的个性化lgY抗体；

(2).抗体纯化与制剂的制备：

用75％的酒精消毒上述个性化疫苗免疫后的卵黄外壳，去壳，去卵黄膜，取出卵黄，卵黄中结核或耐药结核特异性多克隆IgY抗体纯化与制剂制备方法是：

①取卵黄，巴氏消毒，直接冻干，制成含有结核或耐药结核特异性多克隆lgY抗体的蛋黄粉；

②取卵黄，采用水稀释法(WD)法，或聚乙二醇(PEG)法，或硫酸葡聚糖法，或有机溶剂抽提法，或自然胶(藻酸钠、角叉菜胶)法，或乙醇沉淀法等方法，进行分离和提取结核或耐药结核的特异性多克隆IgY抗体，采用层析法，或透析法或超滤法等方法进行纯化，利用DEAE-Sepharose F.F离子交换层析柱或亲和层析法进一步纯化lgY，制得纯的结核或耐药结核特异性多克隆IgY抗体液；

③采用卵磷脂、胆固醇法或聚山梨脂法，进一步将结核或耐药结核特异性多克隆IgY抗体制成脂质体微囊。

3.权利要求1所述个性化特异性多克隆IgY抗体制剂，在结核或耐药结核杆菌感染性疾病的预防以及个性化被动免疫治疗中的应用。

4.权利要求1所述复合型特异性多克隆IgY抗体制剂，在高危人群预防结核及耐药结核杆菌的感染中的应用。

5.权利要求1所述个性化特异性多克隆IgY抗体制剂，在以结核抗原抗体免疫反应为基础的所有免疫检测方法，包括：免疫金标记试纸、沉淀反应、免疫荧光、酶联免疫吸附法ELISA、免疫扩散、免疫电泳、免疫印迹或免疫电镜中的应用。