[发明专利]从甘草中提取异甘草素的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种从甘草中提取异甘草素的方法。 

背景技术：

异甘草素是甘草中价格最为昂贵的重要有效成分之一，具有抗氧化、抗溃疡和抗艾滋病病毒等作用。其抑制单胺氧化酶、抗癌、抗血小板聚集和松弛气管平滑肌等活性突出，部分国家已经将异甘草素作为原料药进行买卖。经笔者文献调研和市场调研得出，异甘草素国际市场需求量大，加之价格昂贵，不难推测，合理的异甘草素提取工艺将带来巨大的经济收益。 

甘草苷和异甘草苷为黄酮苷类物质，甘草素为甘草苷的苷元，异甘草素为异甘草苷的苷元。黄酮苷经酸水解得到相应的苷元，付玉杰在中国药学杂志，2007，42(11)：818-821中报道了在酸性条件下将异甘草苷水解成异甘草素，从而提高异甘草素的产率的方法，该方法的确有效的提高了异甘草素的产率，但该报道没有考虑甘草苷酸水解可生成甘草素，在碱性条件下甘草素可转化异甘草素的因素。 

发明内容：

本发明利用二氢黄酮在碱性条件下可以转化为查尔酮的性质，将甘草苷的酸水解产物甘草素转化为异甘草素，从而明显提高提取异甘草素的产率。本发明的目的可通过以下技术方案实现： 

a.酸水解：将甘草置于反应釜中，加入重量3-20倍浓度为0.5-3mol/L的酸，有惰性气体进行保护的条件下，加热至60-100℃水解60-180分钟，用高效液相色谱确定甘草苷和异甘草苷是否已水解完全； 

b.碱化：酸水解完成后加入碱调节pH值大于10，此时溶液的颜色立即变为橙红色，于20-100℃碱化10-180分钟，用高效液相色谱确定甘草素是否已完全转化为异甘草素； 

c.提取异甘草素：将碱化后的溶液烘干，将烘干后的甘草残留物用乙醇提取1-3次，浓缩，经柱层析得到异甘草素的亮黄色结晶。 

上述酸水解过程中为防止副反应产生，反应釜中最好加入惰性气体。 

上述的甘草可用粉碎机粉碎，过10-80目筛得到甘草粉末； 

上述的碱化步骤后可再进行去碱化，即调节上述碱性溶液pH值为7-10； 

上述加入碱调节pH大于10时所用的碱最好为碱颗粒，因为如此操作可使溶液中局部碱浓度很高并释放大量的热，有利于甘草素转化为异甘草素，但加入 碱时要溶液会因局部过热而产生的喷溅现象，操作时要注意操作人员的安全。利用本专利涉及的方法，提取异甘草素的产率是乙醇超声提取的32倍，是酸水解提取的1.7倍。 

具体实施方式：

实施例1：将甘草粉碎，过30-60目筛，取甘草粉1kg，加入1.5mol/L的盐酸3000mL，在反应釜中充入氮气，将酸水解液加热至100℃水解60分钟。水解完成后缓缓加入氢氧化钠颗粒调整pH值为14，在100℃下碱化10分钟，调节溶液pH值为10，烘干，加乙醇提取2次。浓缩乙醇提取液，经聚酰胺柱层析以60％-90％的乙醇梯度洗脱，得到异甘草素的亮黄色结晶。 

实施例2：将甘草粉碎，过60-80目筛，取甘草粉1kg，加入1mol/L的盐酸20000mL，在反应釜中充入氩气，将酸水解液加热至75℃水解120分钟。水解完成后缓缓加入氢氧化钾颗粒调整pH值为13，在30℃下碱化60分钟，调节溶液pH值为7，烘干，加乙醇提取3次。浓缩乙醇提取液，经硅胶柱层析得到异甘草素的亮黄色结晶。 

实施例3：将甘草粉碎，过60-80目筛，取甘草粉1kg，加入2mol/L的盐酸5000mL，在反应釜中充入氩气和氮气的混合气体，将酸水解液加热至60℃水解180分钟。水解完成后缓缓加入氢氧化钾颗粒调整pH值为12，在50℃下碱化100分钟，调节溶液pH值为9，烘干，加乙醇提取3次。浓缩乙醇提取液，经硅胶柱层析得到异甘草素的亮黄色结晶。 

实施例4：将甘草粉碎，过30-60目筛，取甘草粉1kg，加入3mol/L的盐酸10000mL，在反应釜中充入氦气，将酸水解液加热至90℃水解60分钟。水解完成后缓缓加入氢氧化钙调整pH值为13，在60℃下碱化30分钟，调节溶液pH值为10，烘干，加乙醇提取1次。浓缩乙醇提取液，经硅胶柱层析得到异甘草素的亮黄色结晶。 

实施例5：将甘草粉碎，过10-30目筛，取甘草粉1kg，加入0.5mol/L的盐酸6000mL，在反应釜中充入二氧化碳，将酸水解液加热至80℃水解90分钟。水解完成后缓缓加入氢氧化钠颗粒调整pH值为14，在20℃下碱化180分钟，调节溶液pH值为8，烘干，加乙醇提取2次。浓缩乙醇提取液，经硅胶柱层析得到异甘草素的亮黄色结晶。