[发明专利]一种酸解蜂胶黄酮苷的方法

说明书

技术领域

本发明属蜂胶加工技术，涉及一种酸解蜂胶黄酮苷的方法。

背景技术

蜂胶(propolis)是蜜蜂从植物幼芽、树皮与树干裂缝上采集树脂，并混入其上颚腺分泌物和蜂蜡加工而成的具有芳香气味的胶状固体物。蜂胶在古代阿拉伯医书《医典》上被称为“黑蜡”，也是最早收载于《神农本草经》中露蜂房的主要成分之一。蜂胶具有预防创伤感染、调节免疫、抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖以及抗病原微生物等多种生物学作用。蜂胶的化学成分复杂，含有黄酮类化合物、酸、醇、酚、醛、酯、醚类以及烯、萜、甾类化合物和多种氨基酸、脂肪酸、酶类、维生素和多种微量元素。在这些化学成分中，由于黄酮类化合物含量高，生物学活性强，因此有关蜂胶中黄酮类化合物提取和功效的研究成为热点。

黄酮类化合物是一类在自然界广泛分布的多酚类抗氧化剂。大量研究表明，黄酮类化合物具有清除自由基、抗氧化、抗突变、抗肿瘤、抗菌、抗病毒和调节免疫等功能，其中最重要的是它的抗氧化活性。黄酮类化合物在自然界中多数以黄酮苷的形式存在，只有极少量的以游离黄酮苷元的形式存在。虽然天然存在的游离黄酮苷元含量极少，但其表现出来的活性要比结合型的糖苷高很多。黄酮苷元可以直接被吸收进入动物血液，大部分糖苷型的黄酮化合物在人体内不能通过小肠壁进入到血液中，而是被肠腔内微生物通过杂环裂解方式降解和代谢，其中仅有小部分黄酮在结肠内益生菌(乳酸菌和双歧杆菌)分泌的水解酶的作用下，产生苷元再重新吸收进入血液。因此，黄酮苷在动物体内的生物利用率远远低于苷元型黄酮。研究表明，黄酮苷元清除人体氧自由基的生物活性明显优于黄酮糖苷，黄酮苷元的效价是黄酮糖苷效价的7倍。

蜂胶中已经分离鉴定出的黄酮类化合物有70多种，其中主要的有黄酮类、黄酮醇类、双氢黄酮和黄烷醇类。研究发现，将蜂胶经过硅胶吸附分离后得到四个组分，组分IV中的总黄酮含量相对高于组分I、II、III，其主要成分就是黄酮苷类物质，因此黄酮苷在蜂胶中的含量是比较高的。

发明内容

本发明的目的是提供一种酸解蜂胶黄酮苷的方法，采用盐酸对蜂胶黄酮苷进行恒温酸解，本发明的方法通过以下步骤实现：

称取蜂胶乙醇提取物，放入具塞三角烧瓶中，按固液比m固∶V液(mg∶mL)＝4∶1～1∶4加入水解液(1mol/L～6mol/L盐酸与乙醇配成体积分数为70％的溶液)，放入58℃～98℃的水浴锅中水解0.5小时～4小时，将酸解产物旋转蒸发浓缩得浸膏，冷冻干燥，得蜂胶黄酮苷酸解产物。

所获酸解产物经高效液相色谱测定其黄酮类物质含量，结果显示黄酮苷类物质含量下降，而黄酮苷元类物质含量明显提高。

高效液相色谱测定：精确称取30mgl，1-二苯基-2-苦肼(DPPH)，用无水乙醇溶解并定容到250mL，配成DPPH溶液。取2mL 0.08mg/mL的蜂胶酶解产物，加入2mL DPPH乙醇溶液，混匀，于517nm处测定1min、6min、11min、16min、21min、26min、31min、36min、41min时的吸光度。结果表明获取的酸解产物具有良好的清除DPPH自由基的能力，显著优于原料蜂胶。

本发明是对蜂胶产品的深度开发利用，通过酸解，蜂胶黄酮苷类物质水解为黄酮苷元，与原料相比，产物的抗氧化性能增强。有利于提高蜂产品的附加值，开拓其应用范围。制得的蜂胶酶解产物比原料蜂胶抗氧化性能显著提高，可更好地应用于医药、食品和化妆品等领域。

附图说明

图1是蜂胶中5种黄酮类物质酸解前后含量图。

图2是蜂胶黄酮酸解产物清除DPPH自由基能力图。

图3是蜂胶黄酮酸解产物抗油脂氧化作用。

图4是蜂胶中5种黄酮类物质酸解前后含量图。

图5是蜂胶黄酮酸解产物清除DPPH自由基能力。

图6是蜂胶黄酮酸解产物抗油脂氧化作用。

图7是蜂胶中5种黄酮类物质酸解前后含量图。

图8是蜂胶黄酮酸解产物清除DPPH自由基能力。

图9是蜂胶黄酮酸解产物抗油脂氧化作用。

具体实施方式

本发明结合附图和具体实施例作进一步的说明。

实施例1