[发明专利]一种产角蛋白酶复合酶的宇佐美曲霉及其发酵产酶方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物工程技术领域，特别涉及一种产角蛋白酶复合酶的宇佐美曲霉及其发酵产酶方法。

背景技术

角蛋白酶复合酶的主要成份为角蛋白酶和普通蛋白水解酶，能够比角蛋白酶更加快速高效地水解角蛋白，在饲料生产、鞣革、羊毛处理等工业具有广泛地应用。该法生产的饲料节约能源、成本低、质量好，能够较好的被动物利用。在含角蛋白的饲料中，添加角蛋白酶复合酶也可以提高动物对角蛋白的吸收利用，提高经济效益。角蛋白酶复合酶能够选择性的水解羊毛、皮革表面的角蛋白，有望取代传统的羊毛剥鳞和鞣革工艺，实现传统产业的绿色环保改造。角蛋白酶复合酶能改善化妆品、外用药物在皮肤中的通透性，在医药、化妆品等工业也都有着广泛的应用前景。传统方法单独生产角蛋白酶和蛋白水解酶，然后将它们复合在一起，生产过程复杂、成本相对较高。

宇佐美曲霉Aspergillus usami L88，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号是CGMCC No.2296。

发明内容

本发明的目的是提供一种产角蛋白酶复合酶的宇佐美曲霉及其发酵产酶方法。

产角蛋白酶复合酶的宇佐美曲霉Aspergillus usami L88，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号是CGMCC No.2296。

所述的宇佐美曲霉形态学特征为：菌丝褐色或褐黑色，小梗2层；分生孢子褐色或褐黑色，粗糙或平滑，一般大而呈球形，有时不发达。

所述的宇佐美曲霉的5.8S核糖体具有SEQ ID NO.1的DNA序列，

产角蛋白酶复合酶的宇佐美曲霉的发酵产酶方法包括如下步骤：

1)将宇佐美曲霉L88接种到斜面培养基上，于20～37℃培养72～360小时，得到表面覆盖大量孢子的斜面；斜面培养基成份为：每1000毫升中含麦芽汁100～900毫升、琼脂粉10～20克和水100～900毫升；

2)将宇佐美曲霉L88孢子接种到液体种子培养基中，于20～37℃，80～220rpm条件下培养20～72小时，得到发酵种子；种子培养基成份为：每1000毫升中含玉米粉10～30克、大豆粉20～60克、氯化铵5～30克、磷酸氢二钠3～15克、氯化钙3～15克、鱼粉5～40克，蚕蛹水解液10～100毫升，角蛋白0.1～20克；

3)将发酵种子按发酵培养基体积的3～15％接入发酵罐中，罐温20～37℃、罐压0.2～1.0kg/cm²，搅拌速率80～220rpm，通气量为1∶0.5～1∶2，发酵培养时间72～360小时，发酵培养基成份为：每1000毫升中含玉米粉10～30克、大豆粉20～60克、氯化铵5～30克、磷酸氢二钠3～15克、氯化钙3～15克、鱼粉5～40克，蚕蛹水解液10～100毫升，角蛋白0.1～20克；

4)发酵开始40～150小时后，将占发酵液起始体积5～20％的补料培养基，在0.1～8小时内持续补充到发酵培养基中，补料培养基成份为每1000毫升中含蚕蛹水解液10～990毫升，水10～990毫升。

本发明与现有技术相比具有的有益效果：

1)本发明能够一次性生产角蛋白酶和蛋白水解酶的复合酶，具有生产过程简单、成本低；所得复合酶的相容性好、能避免由于复合酶之间反应造成的酶活降低甚至失活。

2)本发明中的发酵培养基，营养成分配比合理，能够保证宇佐美曲霉L88的生长和高产酸性蛋白酶需要，又能诱导出大量的角蛋白酶，从而生产出比例合理，催化能力强的角蛋白酶复合酶。

3)本发明的发酵过程中利用了对环保不利的角蛋白为底物，成本低，在产角蛋白酶的同时又能解决环境问题，降解后的角蛋白用于饲料等行业可产生较高的经济价值。

4)本发明生产的角蛋白酶复合酶，用于羊毛后整理工业时，能有有效避免环境污染，防毡缩效果好，产品色泽鲜艳，市场占有率高。

5)本发明生产的角蛋白酶复合酶，用于角蛋白废弃物处理时，角蛋白降解速度快、降解率高、氨基酸破坏程度低、营养成份均一，易于被动物吸收和利用。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步详细描述本发明。

实施例1

所述的宇佐美曲霉形态学特征为：菌丝褐色或褐黑色，小梗2层；分生孢子褐色褐黑色，粗糙或平滑，一般大而呈球形，有时不发达。

所述的宇佐美曲霉的5.8S核糖体具有SEQ ID NO.1的DNA序列。