[发明专利]一种利用溶剂回流提取并纯化红杉醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从红豆杉等植物原料中提取红杉醇的方法，具体的是一种利用溶剂回流提取并纯化红杉醇的方法。

背景技术

红豆杉具有极高药用价值，但除了抗癌的作用被开发利用外，其它方面的作用的开发还远不够，大量的红豆杉除了用于生产紫杉醇、10-DAB等紫杉烷类化合物外，其中的其它功效成分基本上没有被利用，造成资源浪费。

红杉醇是从红豆杉提取的一种治疗糖尿病的有效成分，英文名：Sequoyitol化学名：5-0-methyl-myoinositol(或5-氧-甲基-内消旋肌醇)分子式：C₇H₁₄O₆分子量：194.20其化学结构如下：

其在红豆杉皮、枝、叶均含有，含量大约为0.1-0.2％。

中国专利文献公开了上海百灵医药科技有限公司杨继东等申请的“一种提取与纯化红杉醇的方法”(CN1994995)、广州威尔曼新药开发中心有限公司孙明杰等申请的“用于糖尿病预防和治疗的红杉醇和红杉醇植物提取物”(CN1706369)、中国药科大学梁敬钰等申请的“一种防治糖尿病的植物提取物及其制备方法与药物用途”(CN1488344)。

经过临床的生物实验表明，红杉醇降血糖的效果十分明显，其作用机理和目前上市的治疗糖尿病的药物不一样，它可以把糖尿病人身体内被破坏的胰岛系统恢复，有望被开发成治愈糖尿病的药物。作为一种天然产物，红杉醇的提取纯化存在许多问题：1、红杉醇在原料中和普通的天然产物相比含量低，不同植株、不同部位的含量差异较大。2、原料中和红杉醇结构相似的杂质、异构体较多，水溶性好，极性大，不利用常规的分离手段，分离纯化难度大。3、在分离过程中不易用薄层色谱、紫外等监控手段控制分离纯化过程，增加了分离纯化难度。4、现有的红杉醇提取纯化工艺成本高，纯度低，得率低。随着红杉醇市场需求的不断扩大，工业化规模的分离技术、新的工艺日益受到重视，提取纯化工艺的经济性问题倍受关注。

发明内容：

本发明的目的在于提出新的一种利用溶剂回流提取并纯化红杉醇的方法。该方法可有效保证提取的红杉醇质量及纯度，且得率高，成本低。

本发明的技术方案为，一种利用溶剂回流提取并纯化红杉醇的方法，其特征在于，具体方法如下：

(1)、将红豆杉原料进行粉碎至粒径为至少20目；

(2)、制红豆杉浓缩提取物

用提取溶剂对原料进行提取，提取溶剂为低级醇、丙酮、乙腈及其含水溶剂中至少一种，含水溶剂为含水10-50％的低级醇、丙酮、乙腈溶液，料液比为：原料∶提取溶剂＝1∶3-5(w/w)，≤80℃下浓缩，得红豆杉浓缩提取物；

(3)、红杉醇干浓缩物

红豆杉浓缩提取物，≤80℃下，浓缩至流浸膏，在搅拌下，向红豆杉浓缩提取物中加入0.5-2倍(W/W)的惰性填料，充分拌匀后干燥，得红杉醇干浓缩物；

(4)、制红杉醇粗品

红杉醇干浓缩物每次加入3-5(w/w)倍量的甲醇作溶解剂进行回流溶解，至少回流2次，静置，收集回流液，浓缩，冷却，静置，收集固形物或沉淀，干燥得红杉醇粗品；

(5)、制红杉醇晶体

红杉醇粗品加入3-8(w/w)倍量的甲醇作溶解剂进行回流溶解，过滤，收集回流液，浓缩，冷却，静置，(-5)-(5)℃低温结晶，结晶完全后过滤，收集晶体；

(6)、制高纯度红杉醇

红杉醇晶体加入2-5(w/w)倍量的水加热至60-80℃搅拌至晶体溶解，加入1-2(v/v)倍量低级醇、丙酮、乙腈之一，搅拌均匀，80℃保温至少10分钟，静置，冷却至(-5)-(5)℃低温结晶，过滤，收集晶体，至少重复结晶3次，红杉醇晶体，干燥，取样按检测方法进行HPLC检测，得含量≥99％红杉醇高纯品；

所述的红豆杉为中国红豆杉(Taxus chinensis)，东北红豆杉(T.cuspidata)，云南红豆杉(T.yunnanensis)，西藏红豆杉(T.wallichiana)，欧洲红豆杉(T.baccata)，短叶红豆杉(T.brevifolia)，加拿大红豆杉(T.canadensis)，佛罗里达红豆杉(T.floridana)和直立杂种红豆杉(T.media，T.speciosa，T.fastigiata)，红豆杉原料为红豆杉枝、叶、树皮、木质、根。

所述的步骤(2)、(6)中所采用的低级醇类为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇。所述的步骤(3)中的惰性填料为硅藻土、硅胶或活性炭。