[发明专利]高分子聚合物构建的新型基因载体及制备方法

权利要求书

1.高分子聚合物构建的新型基因载体，由交联的阳离子聚合物形成水性核心结构，再与阳离子脂质体形成双分子层结构，并通过聚二乙醇分子稳定粒子结构。

2.根据权利要求1所述的新型基因载体，其特征在于：所述的交联的阳离子聚合物与阳离子脂质体按体积比0.5-2∶1，以疏水作用力形成双分子层结构，聚二乙醇又通过和磷脂共价结合的方式被安插在双分子层结构外层。

3.根据权利要求1或2所述的新型基因载体，其特征在于：所述的阳离子聚合物为聚赖氨酸、聚谷氨酸、聚乙烯亚胺、聚丙烯亚胺、壳聚糖或聚甲基丙烯甲酯。

4.根据权利要求1或2所述的新型基因载体，其特征在于：所述的阳离子脂质体为用N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基硫酸铵或N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-二甲基硫酸铵。

5.根据权利要求1所述的新型基因载体的制备方法，其特征在于：按以下步骤进行：

(1)阳离子聚合物的制备方法为：以分子量1000-5000的聚赖氨酸、聚谷氨酸、聚乙烯亚胺、聚丙烯亚胺、壳聚糖或聚甲基丙烯甲酯进行巯基化修饰后自发反应形成生物可降解的分子量为1万-50万阳离子聚合物，控制交联的修饰度在50％，带电量控制在+50mV、形成亲水的凝胶结构；

(2)阳离子脂质体的制备方法为：先将N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基硫酸铵或N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-二甲基硫酸铵、胆固醇和聚乙二胺硬酯酸磷脂酰胺按重量比0.5-5∶1∶1在放入叔丁醇中进行溶解，溶解后的溶液进行冻干处理以形成稳定混合物，并以无DNA酶的缓冲液进行水化形成悬浮液；再将悬浮液进一步以超声探头加以混合，并通过高压匀浆机破碎，制得阳离子脂质体；

(3)将上述步骤制备得到的阳离子聚合物和阳离子脂质体按体积比2-0.5∶1进行混合，继续通过高压匀浆机进行充分混合和粒径控制在20纳米，其分布区间控制在20％，最终用Millipore PVDF0.22微米的无菌过滤膜进行过滤，得到澄清，粒径均一、小于100纳米的新型基因载体。