[发明专利]一种低分子量漆多糖硫酸酯及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种低分子量漆多糖硫酸酯及其制备方法，属于生物化学领域。

背景技术

自由基是人体代谢活动时产生的一种活性分子，正常情况下自由基具有调节细胞间信号传递和细胞生长的作用。但体内自由基过多可导致细胞和器官损伤，诱发诸如风湿性关节炎、动脉硬化和冠心病之类的疾病，加速机体衰老，最终导致疾病的发生。体内自由基可通过抗氧化剂来清除。目前常用的抗氧化剂有叔丁基对甲氧酚制剂(BHA)和丁基羟基甲苯(BHT)。然而尽管BHA和BHT具有很好的抗氧化效果，但是随着环保意识的增强，越来越多的人开始怀疑这类化学合成抗氧化剂可能诱发肝损伤并导致癌症。因此，从天然产物的途径寻找新型天然抗氧化剂是天然产物开发的一个重要方向。

从大木漆漆液中分离纯化得到的漆多糖是一种含D-半乳糖(约66％mol)、4-O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸(约24％mol)、L-鼠李糖(约5％mol)、L-阿拉伯糖(约3％mol)和D-葡萄糖醛酸(约3％mol)的酸性杂多糖，其主链为1，3-β-D-吡喃半乳糖，并具有4-O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸位于末端的复杂支链结构。

硫酸酯化反应是多糖中引入硫酸酯基的常用方法，此前有关漆多糖硫酸酯化的报道是采用三氧化硫吡啶复合物在二甲亚砜中进行制备的方法，但用此方法制得的漆多糖硫酸酯分子量和取代度较高，抗氧化活性较差。

发明内容

本发明目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种低分子量漆多糖硫酸酯及其制备方法。

实现本发明目的采用的技术方案是：一种低分子量漆多糖硫酸酯，漆多糖硫酸酯取代度在0.19-0.49之间，分子量在0.37×10⁴-0.86×10⁴之间。

上述低分子量漆多糖硫酸酯的制备包括以下步骤：

(1)低分子量漆多糖的制备：将漆多糖溶解于水中，在40～70℃下搅拌至漆多糖完全溶解得到漆多糖溶液，然后加入0.1～1mol/L盐酸或硫酸溶液至漆多糖水解充分，然后将反应混合物用质量百分比浓度为10～15％的NaOH或KOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液在30～50℃下减压蒸馏浓缩，接着用无水乙醇沉淀，将沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖；

(2)低分子量漆多糖硫酸酯的制备：将所得低分子量漆多糖悬浮于50～100倍体积的干燥溶剂中，搅拌至漆多糖充分分散，加入漆多糖糖单元1～2倍摩尔量的三氧化硫吡啶复合物于59～70℃充分反应，然后将反应混合物用冰浴冷却至室温，加入体积为干燥溶剂1/2～1倍的蒸馏水，用质量百分比浓度为10％的NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液在30～50℃下减压蒸馏浓缩，接着用无水乙醇沉淀，将沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。所用干燥溶剂为二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或甲酰胺中的一种。

本发明操作简单，重复性好，制得的漆多糖硫酸酯具有较低分子量和取代度，而且还具有较好的抗氧化活性，可作为抗氧化药物用于替代BHA和BHT。

具体实施方式：

实例1

将0.4g漆多糖溶解于20mL水中，在40℃下搅拌30min，然后加入20mL 1mol/L盐酸溶液，水解6小时。反应混合物用10％NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液在50℃下减压蒸馏浓缩，接着无水乙醇沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖。将0.162g低分子量漆多糖悬浮于16mL二甲亚砜中，加入低分子漆多糖糖单元2倍摩尔量的三氧化硫吡啶复合物于60℃反应4小时，反应混合物用冰浴冷却至室温，加入8mL的蒸馏水，用10％NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，透析内液在50℃下减压蒸馏浓缩，接着用无水乙醇沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。所得低分子量漆多糖硫酸酯分子参数及抗氧化活性列于表1。

实例2