[发明专利]大白栓菌的人工培养方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种大白栓菌的人工培养方法，本发明还涉及大白栓菌在制备增强免疫力 功能的药物、制备抗肿瘤的药物、制备促生长的药物中的应用。

背景技术

大白栓菌Trametes lactinea(Berk.)Pat.是一种多孔菌目多孔菌科栓菌属的大型真菌， 生于阔叶树木材上。在亚洲各国广为分布有，但国内外对大白栓菌的研究极少，特别是在 人工纯化、培养以及用大白栓菌或其提取物在制备增强免疫力功能的药物、抗肿瘤的药物、 促生长的药物中的应用未见详细报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种大白栓菌的人工纯化、培养的方法，本发明的另一个目是提 供大白栓菌在制备增强免疫力功能的药物、制备抗肿瘤的药物、制备促生长的药物中的应 用。

本发明的目的是这样实现的：

1、一种大白栓菌的人工培养方法，其特征在于：

菌种的纯化

a、培养基配制：

先将梨木屑用水加热提取得梨木汁，将玉米粉、石膏和白糖以按35g∶2g∶1g混匀，然 后加入梨木汁700ml，即每700ml梨木汁中混合有玉米粉35g、石膏2g和白糖1g；再加入 物料重量2％琼脂，搅拌均匀后加热至沸，0.1-0.15MPa蒸汽高压灭菌30min；

b、平板的制作及接种：

培养皿各趁热倒入培养基，冷却后即得平板，于无菌操作台上进行接种，将野生大白 栓菌菌丝放到75％酒精中冲洗，然后剪碎放入装有无菌水的小三角瓶中，充分摇匀制成孢 子悬浮液后涂布到平板上；

c、菌体培养：

置28℃恒温培养箱中培养120h，培养皿中分别长出了2-4个菌落，通过电子显微镜 镜检，确定了大白栓菌；

d、菌种的斜面保藏：

向玻璃试管中趁热倒入培养基，包扎平放，冷却后即成斜面；c步骤中培养皿中的各 个菌落于无菌操作台上分别接种到试管中，28℃恒温培养72h，挑选上述生长良好的试管 斜面菌种于冰箱中冷冻保藏；

固体培养基培养

e、固体培养基的制备：

以重量份计：梨木屑40-70，玉米粉10-40，石膏1-3和白糖1-3混合制固体培养基，将 经过纯化的大白栓菌置于培养基内于28℃恒温培养箱中培养7天。

2、根据权利要求1所述的大白栓菌的人工培养方法，其特征在于：固体培养基中各 组分以重量份计为：梨木屑70，玉米粉35，石膏2和白糖1。

3、一种大白栓菌的人工培养方法，其特征在于：

菌种的纯化

a、培养基配制：

先将梨木屑用水加热提取得梨木汁，将玉米粉、石膏和白糖以按35g∶2g∶1g混匀，然 后加入梨木汁700ml，即每700ml梨木汁中混合有玉米粉35g、石膏2g和白糖1g；再加入 物料重量2％琼脂，搅拌均匀后加热至沸，0.1-0.15MPa蒸汽高压灭菌30min；

b、平板的制作及接种：

培养皿各趁热倒入培养基，冷却后即得平板，于无菌操作台上进行接种，将菌丝放到 75％酒精中冲洗，然后剪碎放入装有无菌水的小三角瓶中，充分摇匀制成孢子悬浮液后涂 布到平板上；

c、菌体培养：

置28℃恒温培养箱中培养120h，培养皿中分别长出了2-4个菌落，通过电子显微镜 镜检，确定了大白栓菌；

d、菌种的斜面保藏：

向玻璃试管中趁热倒入培养基，包扎平放，冷却后即成斜面；c步骤中培养皿中的各 个菌落于无菌操作台上分别接种到试管中，28℃恒温培养72h，挑选上述生长良好的试管 斜面菌种于冰箱中冷冻保藏；

液体培养基培养

e、液体培养其的制备：

将梨木屑70g水煮1.5h后过得到的梨木汁；将得到的梨木汗与滤玉米粉35g，石膏 2g和白糖1g和混合并加自来水稀释至700ml，梨木汁用量为5g/100ml，用玻棒搅拌均匀 加热至沸，最后用0.1-0.15MPa蒸汽高压灭菌30min得到液体培养基；

f、三角瓶装入适量培养基灭菌后，于无菌操作台上接种，28℃恒温培养10d天得到 大白栓菌。

大白栓菌在制备增强免疫力功能的药物中的应用。

大白栓菌在制备抗肿瘤的药物中的应用。