[发明专利]一种2型糖尿病相关位点检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及疾病相关位点检测技术领域，更具体地，涉及2型糖尿病相关位点检测方法技术领域，特别是指一种2型糖尿病相关位点检测方法。 

背景技术

2型糖尿病患也叫成人发病型糖尿病，多在35～40岁之后发病，占糖尿病患者90％以上。2型糖尿病患者体内产生胰岛素的能力并非完全丧失，有的患者体内胰岛素甚至产生过多，但胰岛素的作用效果却大打折扣，因此患者体内的胰岛素是一种相对缺乏。通常在临床上应用胰岛素释放试验来区别糖尿病的类型，试验时进食75克葡萄糖，空腹及进食后30分钟、60分钟、120分钟、180分钟各抽血一次测胰岛素及C肽。若空腹血胰岛素及C肽低于正常，且进食后不增高者考虑为1型糖尿病患者；若空腹血胰岛素及C肽正常、增高或稍低，进食后有增高但高峰值延迟，则考虑为2型糖尿病患者。 

2型糖尿病是由遗传因素和环境因素共同作用所引起的，属于多基因疾病，由数个糖尿病基因相互作用所引起的。2型糖尿病患者的病情一般较缓和，由于现在的检测手段过于滞后，有的患者甚至自觉十分健康。如果对于糖尿病不能早期诊断并给予恰当的防治，将可能出现各种慢性并发症，如：心、脑血管疾病，病情严重者可造成身残或早亡；下肢血管病变(糖尿病足，病情严重者需截肢而致残)；糖尿病肾病，晚期需要透析治疗；糖尿病视网膜病变，晚期可以失明以及糖尿病神经病变所引起的一系列症状和体征，这些并发症的出现将使糖尿病患者的生活质量严重下降。对此我们应该尽量多了解一些与糖尿病相关的知识，做到来病先防，有病正确对待并及早调治。 

发明内容

本发明的主要目的就是针对以上存在的问题与不足，提供一种2型糖尿病相关位点检测方法，该检测方法设计巧妙、操作简单、检测结果准确可靠，为是否进一步采取有针对性的健康管理以及后续的检测手段提供参考依据。 

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下： 

一种2型糖尿病相关位点检测方法，其特点是，包括步骤： 

a.提取来自人的样本的基因组DNA； 

b.根据两个2型糖尿病相关基因的序列设计二对引物对，对所述基因组DNA进行PCR扩增，回收PCR扩增产物； 

c.对所述PCR扩增产物进行测序，并分析测序结果来判断所述两个2型糖尿病相关基因是否发生突变。 

较佳的，所述两个2型糖尿病相关基因是PRKCZ基因和CAPN10基因。 

更佳地，所述二对引物对分别用于检测PRKCZ基因的rs427811位点，及CAPN10基因的rs3792267位点。 

较佳的，其中一对所述引物对是SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。 

较佳的，其中一对所述引物对是SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列。 

本发明的创新点在于二个侯检位点的整合，通过选取二个2型糖尿病的侯检位点，根据PRKCZ基因和CAPN10基因分别设计特异性引物，并对来自人的样本的基因组DNA进行PCR扩增，并对扩增产物进行测序，设计巧妙、操作简单、检测结果准确可靠，根据二个侯检位点的具体状况作为2型糖尿病健康管理的主线，监控疾病的发生发展。如果是2型糖尿病遗传倾向较高或很高的人群，建议减少一切2型糖尿病的外在致病因素，并每半年进行一次检查，做到早预防，早发现，早治疗，延缓甚至避免疾病的发生。 

具体实施方式

为更好的理解本发明的内容，下面结合具体实施例作进一步说明。 

1.基因组DNA提取： 

1.1试剂和仪器： 

1.1.1试剂和耗材：基因组DNA抽提试剂盒(TIANamp BLOOD DNA kit，DP318-03；TIANamp Micro微量样品基因组DNA提取试剂盒，DP316；TIANamp口腔拭子基因组DNA提取试剂盒，DP322-03)含：细胞裂解液CL；缓冲液GA；缓冲液GS；缓冲液GB；缓冲液GD；漂洗液PW；洗脱缓冲液TB；Carrier RNA；RNase-free ddH₂O；蛋白酶K(20mg/ml)；吸附柱；收集管(2ML)；1.5ML无菌收集管。无水乙醇。 

1.1.2仪器：DENVILLE260离心机；XW-80A旋涡混合器；H.H.S指针式电热恒温水浴锅。 

1.2提取步骤 

从全血中提取基因组DNA