[发明专利]一种弓形虫PCR检测方法无效
| 申请号： | 200810041553.6 | 申请日： | 2008-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN101649348A | 公开（公告）日： | 2010-02-17 |
| 发明（设计）人： | 胡建华;濮俊毅;高诚 | 申请（专利权）人： | 上海实验动物研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 张 睿 |
| 地址： | 201203上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 弓形虫 pcr 检测 方法 | ||
1.一种弓形虫PCR检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括步骤：
(1)将引物、Taq DNA聚合酶、聚合酶稳定剂、四种单核苷酸、缓冲液、和PCR产物电泳前的上样缓冲液混合，冻干成粉末；
(2)将步骤(1)得到的粉末和样品混合，进行PCR反应，得到PCR产物；和
(3)将PCR产物进行电泳检测；
所述样品包括抽提自哺乳动物尿液和/或粪便的核酸。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQID NO：1和SEQ ID NO：2所示。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的缓冲液是10X PCR缓冲液，其中含有氯化钾，Tris-HCl，和Triton X-100。
4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述的10X PCR缓冲液的配方是500mM氯化钾，100mM Tris-HCl，1v/v％Triton X-100，和双蒸水。
5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，PCR产物电泳前的上样缓冲液是10X上样缓冲液，其中含有丙三醇，和GelRedTM。
6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述的10X上样缓冲液的配方是50v/v％丙三醇，和0.05v/v％GelRedTM。
7.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的Taq DNA聚合酶为红色。
8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的哺乳动物选自灵长类动物、猫科动物、犬科动物、或啮齿类动物。
9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述的哺乳动物选自猴子、猪、猫、犬、大鼠、或小鼠。
10.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的样品还包括阳性对照品和阴性对照品。
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