[发明专利]一种改进的速效胰岛素前体的基因构建方法和性质测定

权利要求书

1.一种用于增加胰岛素前体聚合性质的小肽，其特征在于，所述的小肽的 氨基酸序列如式(I)所示：

X₁X₂X₃X₄X₅X₆X₇X₈X₉X₁₀X₁₁X₁₂X₁₃    (I)

其中，X₁选自Lys或Arg；

X₂选自Gly；

X₃选自Glu；

X₄选自Arg；

X₅选自Gly；

X₆选自Phe或Trp；

X₇选自Phe或Trp；

X₈选自Tyr；

X₉选自Thr或Ser；

X₁₀选自Pro；

X₁₁选自Ala；

X₁₂选自Ala；

X₁₃选自Lys或Arg。

2.如权利要求1所述的小肽，其特征在于，X₁是Lys；X₂是Gly；X₃是 Glu；X₄是Arg；X₅是Gly；X₆是Phe；X₇是Phe；X₈是Tyr；X₉是Thr；X₁₀是Pro；或者

X₁₁是Ala；X₁₂是Ala；X₁₃是Lys。

3.如权利要求1所述的小肽，其特征在于，所述小肽的氨基酸序列为 KGERGFFYTPAAK或KGERGWWYTPAAK。

4.一种胰岛素前体，其特征在于，所述胰岛素前体的从氨基端至羧基端的 氨基酸序列为：胰岛素B链序列-权利要求1-3中任一所述的小肽序列-胰岛素 A链序列。

5.如权利要求4所述的胰岛素前体，其特征在于，所述的胰岛素前体是单 体胰岛素的前体。

6.如权利要求4所述的胰岛素前体，其特征在于，所述的胰岛素前体是选 自下组的胰岛素的前体：B链羧基端去六肽胰岛素；B链羧基端去五肽胰岛素； B链羧基端去四肽胰岛素；B链羧基端去三肽胰岛素；B链羧基端去二肽胰岛 素；B链羧基端去一肽胰岛素或全长胰岛素。

7.如权利要求4所述的胰岛素前体，其特征在于，所述的胰岛素前体是选 自下组的胰岛素的前体：B链羧基端去五肽胰岛素；B链羧基端去四肽胰岛素； B链羧基端去三肽胰岛素。

8.如权利要求4所述的胰岛素前体，其特征在于，所述的胰岛素前体是B 链羧基端去四肽胰岛素的前体。

9.如权利要求5所述的胰岛素前体，其特征在于，所述的胰岛素前体的结 构如下：

10.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸编码权利要求1-3 中任一所述的小肽，或编码权利要求4-9任一所述的胰岛素前体。

11.一种表达载体，其特征在于，它含有权利要求10所述的多核苷酸。

12.一种宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求11所述的表达载体。