[发明专利]一种猪精液冻存液及猪精液处理方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术，尤其涉及猪精液冻存液和猪精液的处理方法。

背景技术

精液冷冻技术对于充分发挥优良种猪的遗传潜力以及地方猪种遗传资源 的保存均有极其重要的应用价值。猪的精液冷冻技术研究始于1956年，Polge 等首次报道应用猪冷冻精液获得产仔。但几十年来，与牛、羊等家畜相比，猪 的冷冻精液应用还相当有限，部分原因是因为猪冻精活力低、受胎率低、产仔 数较鲜精少；部分原因是因为猪精液量大，传统的麦管(0.25/0.5ml)实际应 用中操作不便；而颗粒法冷冻，易造成污染且不易标记。

国外畜牧研究人员一直在探索猪大容量包装，如5ml塑料袋、大管(5ml) 等精液冷冻技术，使之像牛、羊等家畜一样做到一支麦管精液输一头母猪。但 在使用大管法时，目前还没有理想的猪精液的稀释液添加剂、精子密度、冷冻 及解冻方法等的提供。

因此，本领域迫切需要从精子活力、活率、弯尾率、顶体完整率等参数检 查精子质量，以解冻后的精子质量、人工输精结果作为评价指标，筛选出最佳 的猪精液冷冻方法和程序，从而提供高效、实用的猪精液冷冻生产工艺。

发明内容

本发明旨在提供一种猪精液的冻存液。

本发明的另一个目的是提供一种如上述的猪精液的冻存液的用途。

本发明的再一个目的是提供一种猪精液的处理方法。

在本发明的第一方面，提供了一种猪精液冻存液，所述的冻存液每100ml 中含有：

(a)5-20g乳糖；

(b)0.005-0.05g N-乙酰-D-氨基葡萄糖；

(c)0.05-0.5g二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA)；

(d)1.0-5.0ml甘油；

(e)0.2-1.5ml氨基-钠-十二烷基硫酸脂(Orvus Es Paste，OEP)

(f)10-40ml卵黄；和

(g)5-20万国际单位的青霉素和/或链霉素。

在另一优选例中，所述的冻存液每100ml中含有：

(a)8-15g乳糖；

(b)0.008-0.04g N-乙酰-D-氨基葡萄糖；

(c)0.08-0.4gDHA；

(d)1.5-4.0ml甘油；

(e)0.3-1.0ml OEP；

(f)15-30ml卵黄；和

(g)8-15万国际单位的青霉素和/或链霉素。

在本发明的第二方面，提供了一种如上所述的冻存液的用途，所述的冻存 液可用于保存猪精液。

本发明的第三方面，提供了一种猪精液的处理方法，所述的方法包括步骤：

(1)将猪精液和如上所述的冻存液混合，得到含猪精液的混合物；

(2)将步骤(1)得到的混合物加入5ml大管；和

(3)将装有猪精液的大管投入液氮中冻存，得到冷冻保存的猪精液。

在另一优选例中，在步骤(1)得到的混合物中，猪精液的密度为0.5-4×10⁹个/ml；更佳地，密度为0.8-3.0×10⁹个/ml。

在另一优选例中，所述的步骤(1)包括以下步骤：

(1′)将猪精液和乳糖、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、DHA、卵黄、和青霉素 和/或链霉素混合，得到含猪精液的初始混合物，在每100ml初始混合物中含 有：1-8g乳糖，0.008-0.05g N-乙酰-D-氨基葡萄糖，0.05-0.6gDHA，3- 20ml卵黄，1.5-10万国际单位的青霉素和/或链霉素；和

(1″)将步骤(1′)所得到的含猪精液的初始混合物和乳糖、甘油、OEP、 卵黄、和青霉素和/或链霉素混合，得到如上述步骤(1)中所述的含猪精液的 混合物。

在另一优选例中，所述的步骤(1′)在室温下进行；所述的步骤(1″) 在2-8℃进行；更佳地，步骤(1″)在3-6℃进行。