[发明专利]人神经突起生长素在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程和医药领域，具体地，本发明涉及人蛋白神经突起生长素在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

神经突起生长素(Neuritin，NRN1)是1997年发现的一个神经营养因子，全长142aa，分子量15.3KD。主要表达于脑、肝脏、骨骼肌的卫星细胞，心脏和肺也有少量表达。以磷酯酰肌醇锚定位点(GPI)，锚定于细胞膜上，可通过磷脂酶C(PLC)的作用，从膜上脱离并以可溶的形式分布于体液中。作为一种细胞因子起作用。神经突起生长素具有很强的促进神经突起生长，突触连接及成熟的作用，用重组表达的神经突起生长素蛋白刺激原代培养的海马神经元和大脑皮质细胞，可引起神经轴突和树突明显增多延长，在爪蟾和哺乳动物视神经元突起生长的研究中，神经突起生长素也表现出了相同的作用。在我们的前期研究中同样证实了神经突起生长素可以促进PC12细胞突起的生长。神经突起生长素是一个进化上非常保守的蛋白，人与大鼠的蛋白质序列100％同源，而且其表达谱也并不局限于神经系统，证明它是一个生物学功能非常重要的蛋白。特别是近两年，神经突起生长素在神经系统之外的作用逐渐被人们所认识。神经突起生长素在与骨骼肌再生密切相关的卫星细胞中呈高表达，有助于骨骼肌的损伤后修复，证明神经突起生长素能够调节细胞骨架的运动，在神经系统外也具有引导功能。

肿瘤疾病现已上升为世界第2号″杀手″，其死亡人数仅次于心血管病。几年来，国外医学界对于肿瘤疾病的发病机理在细胞基础上又有了新的认识。基于对肿瘤发病机制的进一步理解，人们利用各种途径来研制和开发能够特异，有效地杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无毒性的药物。目前，对于癌症的治疗仍以化疗及放疗为首选，两者虽对肿瘤的治疗取得了相当的疗效，但由于缺乏对肿瘤细胞的特异性因而具有较大的毒副作用以及某些肿瘤细胞对化疗和放疗处理的不敏感，因此在很大程度上限制了它们在临床中的应用。肿瘤血管的形成在肿瘤生长和演进过程中是至关重要的。许多肿瘤开始形成时，并无血管生成活性，它的生长一般也不超过2～3mm3；只有在开启肿瘤血管生成表型之后，肿瘤才得以恶性生长和转移。肿瘤生长和转移是抗癌治疗失败的主要原因之一。血管生成领域的权威学者Folkman曾提出在治疗和研究肿瘤的过程中应当把肿瘤看作是血管内皮细胞群和肿瘤细胞群相互促进，共同参与肿瘤发生发展和转移的过程。尽管两者都是快速增殖的细胞群，但肿瘤细胞遗传背景复杂多变，基因表达谱千差万别，细胞生理习性也相当不稳定，而内皮细胞从各方面来讲都相对稳定得多。相比之下，针对内皮细胞的抗血管生成药物可以不用计较肿瘤细胞内各种细节上的差别，而直接作用于性质稳定的肿瘤血管。因此，他认为将基于血管生成的治疗手段和传统的基于肿瘤细胞的治疗手段的结合加以完善将给肿瘤治疗带去新的希望。

发明内容

本发明的目的是提供人蛋白神经突起生长素(即人Neuritin，NCBI登录号为NP_057672)的新用途。

本发明提供了人蛋白神经突起生长素在制备抗肿瘤药物中的应用。

所述的肿瘤包括肝脏、肺、消化道或者乳腺等部位的良性或者恶性肿瘤。

本发明提供了人蛋白神经突起生长素在制备抗肿瘤血管生成药物中的应用。本发明的人蛋白神经突起生长素在体外可以促进血管内皮细胞迁移、粘附；利用小鼠角膜血管生成模型发现重组表达的神经突起生长素蛋白可以诱导新生血管。神经突起生长素蛋白可以受缺氧诱导，而且在肺癌、肝癌、卡波氏肉瘤、消化道腺瘤等恶性肿瘤中呈现明显上调表达。

可见，神经突起生长素可以促进肿瘤血管生成从而促进肿瘤生长，因此，抑制神经突起生长素的表达就意味着抑制肿瘤生长。

本发明的人蛋白神经突起生长素可以作为筛选和制备抗肿瘤药物中的药靶。

本发明中，术语“神经突起生长素蛋白(NRN1)”指可促进肿瘤生长的、序列与(NCBI登陆号NP_057672)所示多肽序列至少70％同源性的NRN1多肽及其变异形式。这些变异形式包括(但并不限于)：若干个(通常为1-50个，较佳地1-30个，更佳地1-20个，最佳地1-10个)氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加一个或数个(通常为20个以内，较佳地为10个以内，更佳地为5个以内)氨基酸。例如，在本领域中，用性能相近或相似的氨基酸进行取代时，通常不会改变蛋白质的功能。又比如，在C末端和/或N末端添加一个或数个氨基酸通常也不会改变蛋白质的功能。该术语还包括人NRN1蛋白的活性片段和活性衍生物。