[发明专利]乙型肝炎病毒e抗原检测微粒、其制备及应用

权利要求书

1.一种用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，为抗-HBe抗体包被的发光微粒。

2.如权利要求1所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，其特征在于，所述发光微粒粒径为50nm到400nm。

3.如权利要求2所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，其特征在于，所述发光微粒粒径为150-300nm。

4.如权利要求1所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，其特征在于，所述发光微粒表面官能团选自羧基、醛基、胺基、环氧乙基或卤代烷基。

5.如权利要求4所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，其特征在于，所述发光微粒表面官能团选自羧基或醛基。

6.如权利要求1-5中任一权利要求所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，其特征在于，所述抗-HBe抗体包被的发光微粒中，发光微粒与抗-HBe抗体的质量比例为10∶0.2到10∶10。

7.如权利要求6所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，其特征在于，所述抗-HBe抗体包被的发光微粒中，发光微粒与抗-HBe抗体的质量比例为10∶1到10∶4。

8.一种定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，为采用双抗体夹心法检测乙型肝炎e抗原，包括将待测样品和权利要求1-7中任一权利要求所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒，生物素标记的抗-HBe抗体，以及亲和素包被的感光微粒混合进行反应，而后用激发光照射反应孔，测量每个反应孔发光光子量获得光信号值。

9.如权利要求8所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，包括下列步骤：

1)在反应孔中加入待测样品、权利要求1-7中任一权利要求所述用于检测乙型肝炎e抗原的检测微粒和生物素标记的抗-HBe抗体，获得初始反应溶液，混合反应；

2)再加入亲和素包被的感光微粒获得最终反应溶液进行反应；

3)激发光照射反应孔，测量每个反应孔发光光子量获得光信号值。

10.如权利要求9所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，所述步骤1)和2)的反应条件为37℃温育10-120分钟。

11.如权利要求10所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，所述步骤1)和2)的反应条件为37℃温育10-30分钟。

12.如权利要求9所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，初始反应溶液中，所述检测微粒的浓度为50-300ug/ml，生物素标记的抗-HBe抗体的浓度为2-12ug/ml，最终反应溶液中，所述亲和素包被的感光微粒的浓度为30-100ug/ml。

13.如权利要求12所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，初始反应溶液中，所述检测微粒的浓度为50ug/ml-150ug/ml，生物素标记的抗-HBe抗体的浓度为2ug/ml-6ug/ml。

14.如权利要求13所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，初始反应溶液中，所述检测微粒的浓度为50ug/ml，生物素标记的抗-HBe抗体的浓度为4ug/ml，亲和素包被的感光微粒的浓度为60ug/ml。

15.如权利要求9所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，所述初始反应溶液的总体积为30-75ul，最终反应溶液的体积为100-250ul。

16.如权利要求15所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，所述初始反应溶液的总体积为75ul，最终反应溶液的体积为250ul。

17.如权利要求9-16中任一权利要求所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，当定量检测乙型肝炎e抗原时，步骤3后还包括：根据标准曲线计算待测样品HBeAg含量。

18.如权利要求9-16中任一权利要求所述定性或定量检测乙型肝炎e抗原的方法，其特征在于，当定性检测乙型肝炎e抗原时，所述步骤1中，反应孔中加入的为待测样品或HBeAg参考样，步骤3后还包括计算待测样品光信号值与HBeAg参考样光信号的比值，即S/CO值，当S/CO≥1时待测样品被判定为阳性，当S/CO＜1时待测样品被判定为阴性。