[发明专利]一种从深度加工型中药或中药材中提取DNA的方法有效
| 申请号: | 200810034447.5 | 申请日: | 2008-03-11 |
| 公开(公告)号: | CN101270357A | 公开(公告)日: | 2008-09-24 |
| 发明(设计)人: | 周祥山;张元兴;吕品;杨继忠;秦玉峰;尤金花;田守生 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学;山东东阿阿胶股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人: | 王洁 |
| 地址: | 20023*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 深度 加工 中药 中药材 提取 dna 方法 | ||
1.一种从深度加工型中药或中药材中提取DNA的方法,其特征在于,包括下列步骤:
a)用消化液对所述深度加工型中药或中药材进行预处理,使所述深度加工型中药或中药材中的大量胶原蛋白降解,少量DNA则被完全释放溶解于所述消化液中,获得预处理液;
b)采用针对短片段DNA的抽提方法提取所述预处理液中的DNA。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述预处理包括粉碎所述深度加工型中药或中药材成颗粒,加入所述消化液,所述消化液弱碱性且含有SDS,搅拌加热溶解所述颗粒,加入蛋白酶进行消化,所述抽提方法是硅材料吸附法。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述消化液是Tris·EDTA溶液,pH为6~9,所述硅材料吸附法中采用了针对短片段核酸吸附的高离子型溶液。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述消化液的pH为8.0,含有10mmol/LTris-HCl、25mmol/L EDTA、100mmol/L NaCl和0.5%SDS,所述高离子型溶液是PN缓冲液,所述蛋白酶是蛋白酶K。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述步骤a)和所述步骤b)之间,还包括步骤:加入除油脂试剂进行萃取,除去所述处理液中含有的大量油脂。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述除油脂试剂是正己烷。
7.根据权利要求1所述的方法在提取所述深度加工型中药或中药材的DNA中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述深度加工型中药或中药材是因深度加工而导致DNA含量极少,片段极短的中草药或中草药材。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述深度加工型中药或中药材是由动物皮、骨熬炼、精制而成的胶类中药或中药材。
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