[发明专利]一种人源抗人组织因子Fab及其制备方法有效

专利信息
申请号: 200810034154.7 申请日: 2008-02-29
公开(公告)号: CN101423552A 公开(公告)日: 2009-05-06
发明(设计)人: 马端;程训佳;刘静;王羽雄;木金贵;梁旺;王际平 申请(专利权)人: 复旦大学
主分类号: C07K16/36 分类号: C07K16/36;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;C12N1/19;C12R1/19;C12R1/645
代理公司: 上海正旦专利代理有限公司 代理人: 吴桂琴
地址: 20043*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 人源抗人 组织 因子 fab 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种具有高效抗凝作用的人源抗人组织因子Fab,包括重链V区和轻链V区,其特征是含有由序列1的核苷酸编码的序列2的氨基酸序列和由序列17的核苷酸编码的序列18的氨基酸序列。

2.按权利要求1所述的具有高效抗凝作用的人源抗人组织因子Fab,其特征是所述的人源抗人组织因子Fab选自天然的人源抗体基因库。

3.按权利要求1所述的具有高效抗凝作用的人源抗人组织因子Fab,其特征是所述的重链V区由互补决定区CDR和框架区FR构成,所述CDR含有序列4、6和8的氨基酸序列;所述的FR含有序列10、12、14和16的氨基酸序列。

4.按权利要求1所述的具有高效抗凝作用的人源抗人组织因子Fab,其特征是所述的轻链V区由互补决定区CDR和框架区FR构成,所述CDR含有序列:20、22和24的氨基酸序列;所述的FR含有序列26、28、30和32的氨基酸序列。

5.一种表达载体,其特征是同时含有编码权利要求1所述的重链V区氨基酸序列的DNA和轻链V区氨基酸序列的DNA。

6.按权利要求5所述的表达载体,其中所述的表达载体是一种质粒,选自pFab-His2。

7.一种含有权利要求5所述的表达载体的宿主细胞。

8.按权利要求7所述的表达载体的宿主细胞,其特征在于,所述的宿主细胞是大肠杆菌、酵母或真核细胞。

9.按权利要求8所述的表达载体的宿主细胞,其特征在于,所述的宿主细胞是大肠杆菌JM109。

10.一种制备权利要求1的人源抗人组织因子Fab的方法,其特征是包括下述步骤:

通过构建人源抗体基因库并经过ELISA、稀释凝血酶原时间、测序分析从所构建的人源抗体基因库中筛选得到具有抗凝活性的人源抗人组织因子Fab后,进行表达纯化及抗凝活性测定。

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