[发明专利]葡萄球菌蛋白A定量检测试剂盒及定量检测方法有效
申请号: | 200810029896.0 | 申请日: | 2008-07-30 |
公开(公告)号: | CN101339197A | 公开(公告)日: | 2009-01-07 |
发明(设计)人: | 陈校园;杨东升;张旭锋;余波光;赵苗 | 申请(专利权)人: | 广州康盛生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/543 |
代理公司: | 珠海智专专利商标代理有限公司 | 代理人: | 许淑文 |
地址: | 510660广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 葡萄球菌 蛋白 定量 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种葡萄球菌蛋白A定量检测试剂盒,其特征在于,包括:
包被有人IgG的ELISA板;
葡萄球菌蛋白A标准品,包含人工重组的葡萄球菌蛋白A即SPA,该重组蛋 白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示,分子量约27kd,纯度95%以上;
生物素标记的抗SPA抗体;
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素;
常规的样品稀释液;
常规的洗涤液;
常规的显色液;和
常规的终止液。
2.一种定量检测葡萄球菌蛋白A的方法,包括以下步骤:
1)将葡萄球菌蛋白A标准品及待测样品用样品稀释液稀释至适合浓度,加 入包被有人IgG的ELISA板,100μL/孔,37℃60min;所述的葡萄球菌蛋 白A标准品,包含人工重组的葡萄球菌蛋白A即SPA,该重组蛋白的氨基酸 序列如序列表中SEQ ID NO.1所示,分子量约27kd,纯度95%以上;
2)甩去液体,用洗涤液洗涤4次,拍干,加入稀释好的生物素标记抗SPA 抗体,100μL/孔,37℃60min;
3)甩去液体,用洗涤液洗涤4次,拍干,加入稀释好的辣根过氧化物酶标记 链霉亲和素,100μL/孔,37℃60min;
4)甩去液体,用洗涤液洗涤4次,拍干,加入显色液,100μL/孔,37℃孵 育15-30min;
5)加入终止液终止反应,在酶标仪上测定OD450值。
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