[发明专利]丙肝病毒特异性核酶M1GS－hcv/C67的构建方法和应用

权利要求书

1、一种丙肝病毒特异性核酶M1GS-hcv/c67的构建方法，其特征在于是选取丙型肝炎病毒HCV基因组5’UTR中68～80nt之间的序列作为靶位点设计引导序列，将引导序列与大肠埃希菌核酶P共价相联构建得到。

2、根据权利要求1所述丙肝病毒特异性核酶M1GS-hcv/c67的构建方法，其特征在于所述靶位点为c67。

3、根据权利要求1所述丙肝病毒特异性核酶M1GS-hcv/c67的构建方法，其特征在于所述引导序列为：5’-AGACGCTTTCTGC-3’。

4、根据权利要求1所述丙肝病毒特异性核酶M1GS-hcv/c67的构建方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)设计引导序列；

(2)以含M1RNA基因的pFL117质粒为模板，通过引物进行PCR扩增，获得M1GS-HCV/c67的基因片段；

(3)以限制酶KpnI和HindIII对所述基因片段及pUC19质粒载体进行双酶切，并通过T4DNA连接酶将两者连接，构建得到含M1GS-HCV/c67基因的重组质粒。

5、一种权利要求1所述方法构建得到的丙肝病毒特异性核酶M1GS-hcv/c67的应用，其特征在于所述丙肝病毒特异性核酶M1GS-hcv/c67对靶RNA产生定点、特异性切割作用在制备抗病毒药物方面的应用。