[发明专利]一种从仙草全草中提取分离熊果酸的方法

说明书

技术领域

本发明公开了一种从植物中提取分离熊果酸的方法，具体说是一种从仙草全草中提取分离熊果酸的方法。

背景技术

仙草，又名凉粉草，仙人草，仙人冻，薪草等，为唇形科仙草属一年生草本植物。仙草全草干样含有约70％碳水化合物，少量蛋白质、脂肪、色素等，还含有较多的矿物元素。在仙草所含功能性成分中，槲皮素具有抑制癌症细胞生长、降低血压的作用；多糖具有增强和提高机体免疫机能作用；熊果酸既能降血脂，也能降肝脂，是具有开发潜力的降脂护肝药物，还是美容产品中主要的美白成分；香精素有镇静、清凉解毒利水的功效；微量元素具有抑制自由基形成、抗衰老、抗癌的作用；维生素能调节和增强生理机能等。

仙草性寒、甘、淡、凉，药用广泛，有清热利湿、凉血解暑作用。用于急性风湿性关节炎、中暑、热毒、消渴、高血压、肾脏病、糖尿病、关节肌肉疼痛、酒风、淋病等。

目前以仙草为原料开发的系列产品有：即食仙草冻粉、仙草保健茶、仙草可乐型饮料、速溶仙草、仙人板等，这些产品主要是以水为溶剂提取的仙草胶为原料制成的产品。由于不能溶于水，具有美容美白保健效果的熊果酸存在于提取仙草胶后的仙草渣中被当作废物丢弃，造成巨大的资源浪费。目前对从仙草提取熊果酸缺乏系统的研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种简单、低成本、高产率、适合工业生产的一种从仙草全草中提取分离熊果酸的方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现。

1.一种从仙草全草中提取分离熊果酸的方法，其特征在于：该方法如下：

1)提取

①取仙草全草粗粉，在85℃水浴中，以90％(体积分数)乙醇与溶液为提取液，液固比为18∶1，提取2次，每次提取2.5h时，过滤，提取液置于旋转蒸发器，回收乙醇，残渣加入6-8倍量50％氯仿水溶液萃取3次，前两次各两小时，后两次各一小时，合并氯仿层提取液，放置过夜；

②过滤后，将滤液浓缩，回收溶剂至小体积后，放置沉淀得到熊果酸粗提物；

③熊果酸粗提物水洗3次，过滤，滤液弃去，沉淀用丙酮少量多次洗去杂质；

④用无水乙醇溶解后热过滤，放置析晶；

⑤同法重结晶一次；

⑥最后用甲醇-乙醇混合溶剂重结晶；放置得到白色针状结晶；

2)鉴别

①取此结晶用无水乙醇溶解，与熊果酸标准品同时点样；

②在硅胶G板上，以苯∶95％乙醇，比例9∶1为展开剂展开，以醋酐-浓硫酸为显色剂，日光下为紫红色斑点，365nm下为橙黄色荧光斑点，二者Rf值相同，颜色一致；

③以环己烷∶氯仿∶乙酸乙酯，比例20∶5∶8为展开剂展开，显色后在同一位置亦有相同颜色的斑点；

④用少量晶体测定熔点，mp：277℃-278℃；

⑤用所得结晶和熊果酸标准品用甲醇溶解，HPLC含量测定，选用Ultimate XB-C₁₈色谱柱；流动相：甲醇；检测波长：210nm；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；结果提取物结晶的熊果酸含量为97.3％；证明所得晶体为熊果酸。

本发明与现有技术相比具有以下优点。

本发明所用原料廉价易得，对环境基本不产生污染，工艺简单易行、快捷，所获得的熊果酸成本较低、纯度高，提取效率高，适合工业规模化生产。

具体实施方式

下面对本发明作进一步详细描述。

本发明所述的从仙草全草中提取分离熊果酸的方法的具体步骤为：

1)提取

①取仙草全草粗粉，在85℃水浴中，以90％(体积分数)乙醇与溶液为提取液，液固比为18∶1，提取2次，每次提取2.5h时，过滤，提取液置于旋转蒸发器，回收乙醇，残渣加入6-8倍量50％氯仿水溶液萃取3次，前两次各两小时，后两次各一小时，合并氯仿层提取液，放置过夜；

②过滤后，将滤液浓缩，回收溶剂至小体积后，放置沉淀得到熊果酸粗提物；

③熊果酸粗提物水洗3次，过滤，滤液弃去，沉淀用丙酮少量多次洗去杂质；

④用无水乙醇溶解后热过滤，放置析晶；

⑤同法重结晶一次；

⑥最后用甲醇-乙醇混合溶剂重结晶；放置得到白色针状结晶；

2)鉴别

①取少量此结晶用无水乙醇溶解，与熊果酸标准品同时点样；

②在硅胶G板上，以苯∶95％乙醇，比例9∶1为展开剂展开，以醋酐-浓硫酸为显色剂，日光下为紫红色斑点，365nm下为橙黄色荧光斑点，二者Rf值相同，颜色一致；