[发明专利]一种肝素亲和柱及其制备方法和应用无效
申请号: | 200810018999.7 | 申请日: | 2008-02-02 |
公开(公告)号: | CN101306353A | 公开(公告)日: | 2008-11-19 |
发明(设计)人: | 张春妮;王相栋;汪俊军;李克 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军南京军区南京总医院 |
主分类号: | B01J20/286 | 分类号: | B01J20/286 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 | 代理人: | 夏平;刘成群 |
地址: | 210002江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肝素 亲和 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种肝素亲和柱,其特征在于该肝素亲和柱是通过下列方法制备得到的:
a.琼脂糖凝胶6FF首先用环氧氯丙烷进行活化,即在水中分别以终浓度为20~30%(v/v)的琼脂糖凝胶6FF、5~10%(v/v)的环氧氯丙烷、0.3~0.5mol/L的NaOH进行混合,37℃反应1-2h,得到环氧化琼脂糖凝胶6FF;
b.取20g环氧化琼脂糖凝胶6FF加1~2倍体积浓氨水37℃反应1-2h,获得胺化琼脂糖凝胶6FF;
c.胺化琼脂糖凝胶6FF与肝素钠混合物在甲醇中预处理:按1g胺化琼脂糖凝胶6FF中加入30~50mg肝素钠与1~2ml甲醇混合,在氮气环境下室温振摇36-52h,形成醛亚胺;
d.按1g胺化琼脂糖凝胶6FF加20~30mg硼氢化钠比例,将硼氢化钠加入醛亚胺,对醛亚胺还原,得到肝素琼脂糖凝胶6FF。
2.权利要求1所述肝素亲和柱的制备方法,其特征在于该方法为:
a.琼脂糖凝胶6FF首先用环氧氯丙烷进行活化,即在水中分别以终浓度为20~30%(v/v)的琼脂糖凝胶6FF、5~10%(v/v)的环氧氯丙烷、0.3~0.5mol/L的NaOH进行混合,37℃反应1-2h,得到环氧化琼脂糖凝胶6FF;
b.取20g环氧化琼脂糖凝胶6FF加1~2倍体积浓氨水37℃反应1-2h,获得胺化琼脂糖凝胶6FF;
c.胺化琼脂糖凝胶6FF与肝素钠混合物在甲醇中预处理:按1g胺化琼脂糖凝胶6FF中加入30~50mg肝素钠与1~2ml甲醇混合,在氮气环境下室温振摇36-52h,形成醛亚胺;
d.按1g胺化琼脂糖凝胶6FF加20~30mg硼氢化钠比例,将硼氢化钠加入醛亚胺,对醛亚胺还原,得到肝素琼脂糖凝胶6FF。
3.权利要求1所述肝素亲和柱在分离纯化与肝素有特异结合能力的物质中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于与肝素有特异结合能力的物质为载脂蛋白H(Apolipoprotein H,Apo H)、抗凝血酶III(Antithrombin III)、肝生长因子、碱性成纤维细胞生长因子或蛇毒类凝血酶安克洛。
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