[发明专利]一种降血糖红芪杂多糖及其提取分离工艺

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，涉及一种植物多糖的提取分离方法，尤其涉及一种降血糖红芪多糖的提取分离工艺；同时还涉及该分离纯化的红芪多糖的组成。

背景技术

红芪为豆科植物多序岩黄芪(Hedyssarum polybotrys Hand-Mazz)的干燥根，是我国独特品种，甘肃著名特产。以前中国药典将红芪列在黄芪项下，生产中成药时可用红芪代替黄芪。1985年版药典将红芪单列，红芪不能代替黄芪使用。由于红芪在中药处方中的应用较少，限制了红芪在医药中的应用。据记载，红芪具有补气固表，利尿脱毒，排脓，敛疮生肌等多种功效，用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，血虚萎黄，内热消渴等的治疗。现代医学研究表明，红芪多糖对慢性肾炎及蛋白尿也有一定的治疗作用。

国内对红芪多糖的研究主要是总多糖药效学研究，如增强细胞免疫功能的作用，抗衰老作用，试验性肝损伤的保护作用。1997年兰州大学的刘方明从红芪中提取分离出一种均多糖-葡聚糖，其提取方法是：用水在100℃提取4小时，过滤，滤液浓缩，用sevage法除蛋白后，水溶液用3倍量的乙醇沉淀，然后将沉淀溶解于水中，用Sephadex G-200柱层析纯化红芪多糖，得到3种不同分子量的红芪均多糖。

甘肃中医学院学报，2007年01期发表的《红芪多糖对实验性T2DM大鼠胰岛素抵抗和C肽分泌作用的研究》一文中指出，红芪均多糖可明显降低血糖，有效控制体重，改善2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗。中国中医药信息杂志，2007年05期刊登了《红芪多糖对改善2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的影响》，文中指出，红芪多糖可通过多途径多环节减轻糖尿病模型大鼠的胰岛素抵抗。

发明内容

本发明的目的是提供一种降血糖红芪杂多糖的提取分离工艺。

本发明的另一目的是提供该提取分离的降血糖红芪杂多糖的组成。

一、红芪杂多糖的分离纯化

本发明红芪杂多糖的分离纯化工艺，包括以下工艺步骤：

(1)红芪杂多糖的分离

将红芪药材用药材体积5～18倍量的水，30℃～100℃提取1～5次，每次提取0.5～3.0小时，合并水溶液，浓缩至体积为药材的1～5倍；向浓缩液中加乙醇，使乙醇浓度达20％～85％，沉淀，过滤，得沉淀1；向滤液中再加入乙醇，使乙醇浓度达20％～85％，沉淀，过滤，得沉淀2；向滤液中继续加入乙醇，使乙醇浓度达20％～85％，沉淀，过滤，得沉淀3；然后将所得沉淀1、2、3干燥，分别得红芪多糖1，红芪多糖2，红芪多糖3。红芪多糖1，2，3的含量都在50％以上。上述干燥可采用冷冻干燥、或喷雾干燥、或40℃～100℃下真空干燥、常压干燥。

为了除去药材中的杂质，红芪药材在水提取前，先用乙醇浸泡0-24小时，然后回流1-12小时，过滤，将药渣除去残留的乙醇后，再用水提取多糖。

本发明采用先分离(红芪多糖含量高，一般在50％以上)，后纯化的工艺，节约成本，并适合于工业化生产。

(2)红芪杂多糖的纯化

红芪多糖1，2，3除蛋白和色素：红芪多糖1，2，3分别加蒸馏水，加热溶解后，冷却，分别加入胃蛋白酶，37℃酶解，离心，弃去沉淀，上清液Sevage法除蛋白质，然后用双氧水脱色，再分别加乙醇，使乙醇浓度分别为20-85％，静置，离心，分别得红芪多糖I、II、III。

红芪多糖I，II的纯化：将红芪多糖I，II分别溶于蒸馏水中，离心除去不溶物，上清液上Sephadex G-200分离，用0.9％NaCl溶液洗脱，洗脱速度为0.2mL/min，每3mL收集一份，苯酚-硫酸法跟踪检测，红芪多糖I、II的凝胶色谱吸收曲线图分别见图1、图2，透析后干燥，得到红芪多糖Ia、IIa。

红芪多糖III的纯化：将红芪多糖III溶于蒸馏水中，离心除去不溶物，上清液用Sephadex G-25分离，分别用0.9％NaCl溶液和蒸馏水洗脱，洗脱速度0.2mL/min，每3mL收集一份，苯酚-硫酸法跟踪检测，绘制凝胶色谱吸收曲线见图3，透析后干燥，得到红芪多糖IIIa和IIIb。

二、红芪多糖组成的测定：

1、红芪多糖的气相色谱测定：

1.1供试品溶液(糖腈乙酰酯衍生物)的制备