[发明专利]寡核苷酸芯片及其应用

权利要求书

1.一种基于biotin-avidin-cy3反应系统的随机引物PCR扩增标记的寡核苷酸芯片， 由基片和阵列涂布于其上的CMV、HSVI、RV、EBV或TB病原体探针以及阴性对照、阳性 对照、空白对照制成，其特征在于：所述基片是表面醛基化修饰的载玻片；所述病原体 探针是10条5’端合成有一个氨基、6个CH₂碳臂和15个T的寡核苷酸序列的、点样浓度均 为10μM的CMV-1、CMV-2、HSVI-1、HSVI-2、RV1、RV2、EBV1、EBV2、TB1和TB2探针；所述阴性对 照为5’端合成有一个氨基、6个CH₂碳臂和15个T的寡核苷酸序列的、点样浓度为10μM 的JEV探针；所述阳性对照为5’端合成有一个氨基、6个CH₂碳臂和15个T的寡核苷酸序 列的、点样浓度为10μM的合成标记探针，探针的序列为NH2-(CH2)6-Poly(dT)15-Tamra；所 述空白对照为双蒸水；所述芯片的阵列布局如图1所示；其中：上述CMV-1、CMV-2、HSVI-1、 HSVI-2、RV1、RV2、TB1、TB2、EBV1和EBV2探针具体序列为：

CMV-1：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

CGTCTCACGGTCTCGGGACTGGCCTGGACGCGTCAGCAGAACCAGTGGAAAGAGCCCGACGTCTACTACA；

CMV-2：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

GAGCGGCAGAAACGGGTGGACGACGAGGTGGTGCAGCGTGAGAAACAGCAGCTGAAGGCTTGGGAGGAGA；

HSVI-1：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

GACAAACCCAACCGTCCCGTAGTCCCATCCCCCGATCCCAACAACTCCCCCGCGCGCCCGGAGACCAGTC；

HSVI-2：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

CCCCGCTGTTCTCGTTCCTCACTGCCTCCCCCGCCCTGGACACCCTCTTCGTCGTCAGCACCGTCATCCA；

RV1：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

CCACCGACACCGTGATGAGCGTGTTTGCCCTCGCCAGCTACGTCCAGCACCCTCACAAGACCGTCCG；

RV2：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

CCCCGACTGGGCCTCCCCGGTTTGCCAACGCCATTCCCCTGACTGCTCGCGGCTCGTGGG；

TB1：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

GCCAACATACCCGCCGAGTTCTTGAAGAACTTCGTTCGTAGCAGCAACCTGAAGTTCCAGGATGCGTACA；

TB2：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

CTGCCAGACTTACAAGTGGGAACCTTCCTGACCAGCGAGCTGCCGCAATGGTTGTCCGCCAACAG；

EBV1：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

CGTCCCGTAGTCCCATCCCCCGATCCCAACAACTCCCCCGCGCGCCCCGAGACCAGTCGCCCGAAGACAC；

EBV2：NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

CCACGACACACTGATGAACACCACCACGATGACTCCCTCCCGCACCCTCAACAAGCTACCGACGATTCTA；

所述阴性对照探针具体序列为：

NH2-(CH2)6-Poly(dT)15

GTGCAAACAAGGTTTCACTGATCGTGGGTGGGGCAACGGATGTGGACTTTTCGGGAAGGGAAGCATTGAC。