[发明专利]“海普诺”在制备治疗2型糖尿病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药，具体地说是一种海洋天然活性化合物“海普诺”的制备方法、药理活性及药学用途。该化合物及其衍生物作为胰岛素增敏剂，可用于治疗胰岛素抵抗类2型糖尿病。

背景技术

糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)是一种慢性的代谢分泌内分泌疾病，据2007年国际糖尿病联盟(IDF)资料，全世界成年糖尿病患者人数约2.46亿，其中2型糖尿病(T2DM)患者占总糖尿病患者90％以上。到2025年，全世界的糖尿病患者人数预计将达到3.8亿。目前用于治疗T2DM的药物主要有双胍类、磺脲类、α-糖苷酶抑制剂和噻唑烷二酮类等，由于它们多是针对病症而不是针对病因分子靶点药物的设计，因而存在各种弊端。因此，市场急需安全有效、价格合理且能长期安全服用的降糖药物。

胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的关键因素，酪氨酸磷酸化是胰岛素效应实现的重要环节，受PTK和PTP共同调节。PTK在胰岛素信号传递中的作用很早即被人们关注，但直到最近，人们才逐渐认识到PTP在糖尿病发病中的重要性。Gold-stein研究表明，胰岛素抵抗患者的胰岛素靶组织中PTP1B和LARPTP表达增加，且能阻断胰岛素受体酪氨酸的激活以及胰岛素的信号转导；Elchebly等发现，PTP1B基因剔除鼠可提高胰岛素的敏感性，且增敏效应具有组织特异性。研究表明，胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的关键因素，PTP1B在胰岛素信号转导中的负调控作用，现已证实它在T2DM的发生、发展过程中起重要作用，可能成为T2DM的病因新靶点。

国际上对PTP1B抑制剂的研究不多，主要有以下几类：(1)、肽类：含磷酸化酪氨酸残基(pTyr)的肽类底物与PTP1B有较高的亲和性，但其化学和生物稳定性差；(2)、萘醌类Naphthnoquinone：通过修饰PTPase的活性位点来抑制酶的活性；(3)、噻唑烷二酮类Azolidinediones：通过增加靶器官的胰岛素敏感性来改善血糖的控制，主要包括ciglitazone、troglitazone和rosiglitazone，但由于严重的肝脏毒性，ciglitazone已从市场撤出；(4)、Benzo[b]naphthol[2，3-d]furans和thiophenes类：以benzbromarone为先导化合物进行设计合成的系列Benzo[b]naphthol[2，3-d]furans和thiophenes类化合物，在小鼠体内表现出良好的降血糖活性，但要最终成为治疗糖尿病药物还需要克服很多障碍，如电负性高、细胞膜通透性差以及选择专一性差等，以上因素都使这些抑制剂的成药性降低；目前尚未见溴酚类化合物作为PTP1B抑制剂抗糖尿病方面的研究报道。

发明内容

本发明目的在于提供一种新型的胰岛素增敏剂-“海普诺”，该化合物及其衍生物通过抑制蛋白酪氨酸磷脂酶1B的活性，增强胰岛素受体敏感性，可用于治疗胰岛素抵抗类2型糖尿病。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

1、“海普诺”的制备与结构鉴定

风干的松节藻Rhodomela confervoides样品粉碎后用95％乙醇提取，提取液减压浓缩；浓缩物用蒸馏水悬浮后，用乙酸乙酯萃取，减压浓缩。乙酸乙酯萃取部位进行硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮梯度洗脱，直至二者体积比为1∶1，改用氯仿-甲醇梯度洗脱，最后用95％乙醇洗脱，薄层色谱检查，合并成分相似的洗脱液，减压浓缩得14个部分L₁～L₁₄。L₉部分[氯仿∶甲醇＝4∶1]洗脱部分经过硅胶色谱，采用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，重结晶可得纯化合物，经波谱分析，此化合物为3-溴-4-[2′，3′-二溴-4′，5′-二羟基苯基]甲基-5-(乙氧基)-1，2-二苯酚(中文)；3-bromo-4-[2′，3′-dibromo-4′，5′-dihydroxypheny]methyl-5-(ethoxymethyl)1，2-benzenediol(英文)。

2、蛋白酪氨酸磷脂酶1B抑制活性测定