[发明专利]以BCIP/NBT为底物的显色蛋白芯片及其在自身抗体检测中的应用

权利要求书

1.一种以BCIP/NBT为底物的显色蛋白芯片，由基片和阵列涂布于其上的12种抗原以及阴性对照、阳性对照、空白对照制成，其特征在于：所述基片是APES修饰的玻片；所述12种抗原的种类及其点样浓度为ANA：520μg/ml，Ro-60/SSa：465μg/ml，La/SSb：530μg/ml，Jo-1：530μg/ml，Scl-70：525μg/ml，Sm：520μg/ml，Ro-52/SSa：615μg/ml，RF：340μg/ml，CCP：465μg/ml，u1RNP：410μg/ml，CENP-B：490μg/ml，dsDNA：580μg/ml；所述阴性对照为5μg/ml Human IgG；所述阳性对照为250μg/mlHuman IgG；所述空白对照为含0.1％Tween20的TBST；所述阵列布局如图1所示。

2.权利要求1所述以BCIP/NBT为底物的显色蛋白芯片在自身抗体检测中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述芯片应用方法是以BCIP/NBT为底物的碱性磷酸酶显色法作为蛋白芯片的终点检测信号。

4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述芯片应用方法是将制备好的蛋白芯片经37℃温育1h、37℃封闭30min、37℃与血清反应30min、37℃与碱性磷酸酶标记的二抗反应30min、BCIP/NBT显色20～30min，用扫描仪扫描图像，Totallab软件进行灰度分析、以同一芯片相应区域的阴性、阳性对照的灰度值作为阴性和阳性的Cutoff值对结果判读。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于：所述扫描仪采用UMAX PowerLookIII扫描仪。