[发明专利]一种充气培养单细胞藻类的方法

说明书

技术领域

本发明涉及藻类的培养，具体地说是一种充气培养单细胞藻类的方法。

背景技术

单细胞藻类是贝类育苗幼体培育过程中的主要饵料，是决定贝类育苗的关键因素之一。但是在贝类育苗中常常出现饵料供不足、不及时以及生产池饵料污染严重，藻种又不能及时供应等情况，从而造成饵料生长高峰期和幼体需求不协调的现象。生产上采用的单细胞藻培养方法一般包括一下几个环节：保种，一级培养，二级培养，三级培养(大池培养)。传统的一级和二级培养通常在泡沫薄膜袋、50L塑料桶和小型水泥池培养，培养速度慢，并且很容易污染。一般认为，充气培养能使藻细胞和培养环境充分接触，从而增加藻细胞的生长速度，但因为充气容易使培养环境受到污染，也同时加大了管理的难度，因此也具有一定风险性，有些生产单位采取传统的充气培养法，因为管理不善、操作不规范等原因往往引起藻种全部污染，导致贝类幼体饵料严重短缺，甚至使育苗失败。

发明内容

根据多年积累的经验，申请人对二级培养的方法进行了改进，经过几年的生产实验验证，本发明的目的在于提供一种具有操作方便、藻类生长稳定快速、无污染的充气培养单细胞藻类方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为；

一种充气培养单细胞藻类的方法，在温度18-35℃和自然光照(光照范围为3500-33000lux)条件，于装满沙滤自然海水的培养瓶中进行单细胞藻的充气培养，充气量为4-8L/min，

所述培养瓶为透明塑料瓶，培养瓶瓶口上塞有用于密封的橡胶塞，在橡胶塞上钻有两个直径为0.8-1cm的小孔，每个小孔插入一段8-10cm长、粗细与小孔孔径一致的玻璃管；其中一个小孔插入一段8-10cm长、粗细与小孔孔径一致的玻璃管；玻璃管用于通风，其上面塞有消毒处理的脱脂棉以防止灰尘污染；另一个小孔内穿套有充气管，其于培养瓶瓶体内的一端与散气石相连，瓶体外的一端通过气排经2-3个空气过滤器与充气泵或鼓风机相连；

用充气泵或鼓风机充入空气，空气先经空气过滤器过滤，然后通过气排分散到培养瓶中进行用于贝类育苗饵料单细胞藻类的一级或二级大规模生产培养。

所述单细胞藻类为贝类育苗中的常用种类，其可为硅藻(新月菱形藻，三角褐指藻)、金藻(等鞭金藻3011，3012和叉鞭金藻)和/或扁藻(青岛大扁藻)，本发明可用于它们的高密度、大规模培养。

本发明对培养基进行了优化，可于每升沙滤、消毒的自然海水中添加有1ml培养母液，

所述优化后的母液营养盐基础配方为Na₂NO₃ 120g，KH₂PO₄ 4g；将营养盐溶于1000ml蒸馏水中，配置成母液备用，使用时每升培养液加1ml母液；

当单细胞藻类为硅藻时，母液营养盐基础配方中还添加有Na₂SiO₃ 5g，FeC₅H₅O₇ 2.5g；

当单细胞藻类为扁藻时，母液营养盐基础配方中还添加有FeC₅H₅O₇0.5g；

当单细胞藻类为金藻时，母液营养盐基础配方中还添加有维生素B₁100mg，维生素B₁₂ 0.5mg。

所述培养瓶为市面上常用的18.9L的透明塑料纯净水瓶；在进行单细胞藻的充气培养前，于培养瓶中加满过滤海水，再加入次氯酸或次氯酸钠消毒液消毒，使培养瓶中有效氯含量达到40～80×10⁶。

本发明具有如下优点：

1)生长快。本发明方法能显著提高单细胞藻类的生长速率，用该方法培养的新月菱形藻、金藻3011、3012和扁藻的特定生长率分别是对照组的1.4，1.8，1.4和1.7倍；相对生长率分别是对照组的3.4，10.3，5.0和7.2倍；绝对生长率分别是对照最的3.3，9.8，4.9和6.8倍。

2)密度大。本发明能大幅度提高藻液的培养浓度，新月菱形藻、金藻3011、3012和扁藻的最大培养密度分别为2957，1700，2355和350万cell/ml，远远大于常规培养方法的培养密度。

3)持续时间长。本发明能延长藻细胞的生长期，新月菱形藻、金藻3011、3012和扁藻藻细胞密度高峰期分别推迟3天，3天，0天和6天，维持较高密度的时间分别达到14，14，17和17天。