[发明专利]α－淀粉酶变体

权利要求书

1.亲代Termamyl-样α-淀粉酶的变体，与亲代α-淀粉酶相比，所述α-淀粉酶变体中，表面有一个或多个暴露于溶剂的氨基酸残基发生变化以使该α-淀粉酶的总体亲水性增加和/或表面上所述暴露于溶剂的氨基酸残基的侧链中甲基总数增加。

2.亲代Termamyl-样α-淀粉酶的变体，该变体在选自下列的一个或多个位置处具有变化：E376，S417，A420，S356，Y358；

其中：(a)所述变化各为：

(i)在占用上述位置的氨基酸的下游插入一个氨基酸，

(ii)缺失占用上述位置的氨基酸，或

(iii)用不同的氨基酸取代占用上述位置的氨基酸，

(b)所述变体具有α-淀粉酶活性，和(c)每个位置对应于具有SEQ IDNO：4氨基酸序列的亲代Termamyl-样α-淀粉酶的氨基酸序列位置。

3.权利要求1-2中任一项的变体，其中亲代Termamyl-样α-淀粉酶得自地衣芽孢杆菌，解淀粉芽孢杆菌，嗜热脂肪芽孢杆菌的菌株，芽孢杆菌菌种NCIB 12289，NCIB 12512，NCIB 12513或DSM 9375。

4.DNA构建体，其含有编码权利要求1至3中任一项的α-淀粉酶变体的DNA序列。

5.重组表达载体，其携有权利要求4的DNA构建体。

6.被权利要求4的DNA构建体或权利要求5的载体转化的细胞。

7.去污剂添加剂，其含有权利要求1至3中任一项的α-淀粉酶变体，所述变体任选为不成粉末的颗粒，稳定化的液体或被保护的酶的形式。

8.组合物，其含有：

(i)具有SEQ ID NO：4所示序列的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶与得自具有SEQ ID NO：3所示序列的嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶(作为亲代Termamyl-样α-淀粉酶)的权利要求1至3中任一项的一种或多种变体的混合物；或

(ii)具有SEQ ID NO：3所示序列的嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶与得自一种或多种其它亲代Termamyl-样α-淀粉酶的权利要求1至3中任一项的一种或多种变体的混合物；或

(iii)得自具有SEQ ID NO：3所示序列的嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶(作为亲代Termamyl-样α-淀粉酶)的权利要求1至3中任一项的一种或多种变体与得自一种或多种其它亲代Termamyl-样α-淀粉酶的本发明的一种或多种变体的混合物。

9.权利要求1至3中任一项的α-淀粉酶变体或权利要求8的组合物用于洗涤和/或洗碟、织物脱浆或淀粉液化的用途。

10.产生亲代Termamyl-样α-淀粉酶的变体的方法，其中变体相对于亲代而言，在高温下表现出增加的稳定性，所述方法包括：

(a)对编码亲代Termamyl-样α-淀粉酶的DNA序列进行随机诱变，

(b)在宿主细胞中表达步骤(a)中得到的突变DNA序列，和

(c)筛选表达突变α-淀粉酶的宿主细胞，相对于亲代Termamyl-样α-淀粉酶而言，所述变体在高温下具有增加的稳定性。