[发明专利]多肽有机化合物及其在异种移植中的应用

说明书

(本案为申请号2006100501640的分案申请)

技术领域

本发明属有机化合物，主要涉及多肽类有机化合物，尤其是关于人工合成的多肽有机化合物及其在异种移植中的应用。

技术背景

医学技术的进步使人类同种器官移植成为了可能。由于人体器官的来源不足，大量的病人得不到急需的器官，利用猪的器官代替人体器官是目前研究的热点。但由于猪的细胞表面存在异种抗原表位Gal-α-1，3-Gal能与人体内预存的天然抗体结合产生超急性排斥反应，从而导致异种器官移植的失败。人们在努力寻找一种方法可以封闭或清除人天然抗α-Gal抗体，为异种器官移植开辟途径。噬菌体展示技术是一种能够筛选与靶分子结合的特异性多肽的有力工具，已成功运用于抗原表位，特异性受体激动剂或抑制剂和疫苗的研究。在本实验中我们利用噬菌体展示技术，对两种肽库，线性7肽库和C7C文库，进行了亲和筛选。线性7肽库中展示的多肽没有结构限制，具有相对柔性的结构。C7C肽库展示的多肽由于有一对二硫键的限制而形成环状，构象相对稳定。同时采用两种肽库进行筛选，目的在于比较由于结构不同而造成的筛选出的多肽在氨基酸序列上的差异。由于抗B型血单克隆抗体有结合α-Gal抗原表位的特性，因此我们以抗B型血单克隆抗体为靶分子，筛选出能够模拟α-Gal抗原表位的多肽，可以特异地阻断天然抗α-Gal抗体，可以用于异种器官移植超急性排斥反应。

目前临床常用的免疫抑制剂有环孢素A、糖皮质激素、硫唑嘌呤、环磷酰胺等，可以降低整体的免疫反应，但对异种器官移植超急性排斥反应无效，并且有多种副作用，如常见的就有骨髓抑制、肝肾毒性、上消化道出血、脱发等等。我们筛选到的多肽化合物可以特异地阻断异种器官移植超急性排斥反应，但不影响人体的整体免疫反应，可避免常用免疫抑制剂引起的副作用。

发明内容

本发明的目的是克服目前临床上异种器官移植术中出现的排斥反应，设计并提供一种多肽有机化合物。

本发明提供的多肽有机化合物，选自a、b、c、d、e、f、g、h八种中的一种，能与抗B型血单克隆抗体特异性结合，溶于水，各氨基酸之间通过肽键相连。

本发明提供的多肽有机化合物a的氨基酸序列为：Phe-His-Glu-Asn-Trp-Pro-Ser，分子量为915.96；多肽有机化合物b的氨基酸序列为：Phe-His-Glu-Phe-Trp-Pro-Thr，分子量为963.06；多肽有机化合物c的氨基酸序列为：Ser-Met-Leu-Asp-Thr-Pro-Thr，分子量为763.86；多肽有机化合物d的氨基酸序列为：Cys-Leu-Pro-Thr-Ile-Thr-Asn-Thr-Cys，(其中第1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为963.15；多肽有机化合物e的氨基酸序列为：Cys-His-Ile-Leu-Gly-Ser-Thr-Ala-Cys，(其中第1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为902.07；多肽有机化合物f的氨基酸序列为：Cys-His-Pro-Thr-Trp-Ser-Ser-Leu-Cys，(其中第1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为1031.18；多肽有机化合物g的氨基酸序列为：Cys-His-Gln-Thr-Pro-Leu-Ser-Thr-Cys，(其中第1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为987.13；多肽有机化合物h的氨基酸序列为：Cys-Lys-Pro-Thr-Ser-Thr-Leu-Thr-Cys，(其中第1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为951.14。

本发明的第二个目的是提供多肽有机化合物a、b、c、d、e、f、g、h在制备治疗器官移植术中控制异种移植中超急性排斥反应的药物中的应用。

本发明的优点有：

①本发明的多肽有机化合物，由于分子组成只有7～9个氨基酸，故可以用人工化学合成方法大量合成，可以得到大量较纯的小肽。

②能与人体内预存的抗猪抗原的抗体特异性结合，从而封闭它的作用，可以抑制猪器官移植至人体时发生的超急性排斥反应。

③本发明的多肽有机化合物与人体内预存的天然抗α-Gal抗体的结合位点是特异性的，正好起到封闭抗体作用，从而避免了由于作用位点特异性不强而带来的副作用。

④由于本发明的多肽有机化合物的组成氨基酸数量较少，开发成药物后容易被机体利用而起效。

附图说明

图1为三种线性多肽与水苏糖竞争性与抗B单克隆抗体结合的ELISA抑制率曲线图。