[发明专利]鸡β肌动蛋白基因内含子1的用途有效

申请号：	200780052196.7	申请日：	2007-06-21
公开（公告）号：	CN102124019B	公开（公告）日：	2017-09-15
发明（设计）人：	米祖·惠	申请（专利权）人：	惠觅宙
主分类号：	C07H21/04	分类号：	C07H21/04
代理公司：	北京方韬法业专利代理事务所11303	代理人：	遆俊臣
地址：	浙江省杭州市江干区***	国省代码：	浙江;33
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摘要：
搜索关键词：	肌动蛋白基因内含用途
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【权利要求书】：

1.一种用于哺乳动物细胞中多肽重组生产的稳定表达载体，其包括(a)哺乳动物启动子序列，(b)编码重组多肽的DNA序列，(c)polyA位点，以及(d)增强该多肽表达的富含GC的DNA片段，所述富含GC的DNA片段的序列为SEQ ID No：1或SEQ ID No：13。

2.如权利要求1所述的稳定表达载体，其中增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物启动子序列的5’侧翼区。

3.如权利要求1所述的稳定表达载体，其中增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物启动子序列的3’侧翼区。

4.如权利要求1所述的稳定表达载体，其中增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物表达载体的polyA位点的3’侧翼区。

5.一种用于多肽的重组生产的方法，包括在稳定表达载体的控制下于高密度细胞生长的条件下稳定表达哺乳动物细胞中的多肽，所述稳定表达载体包括(a)哺乳动物启动子序列，(b)编码重组多肽的DNA序列，(c)polyA位点，以及(d)增强该多肽表达的富含GC的DNA片段，所述富含GC的DNA片段的序列为SEQ ID No：1或SEQ ID No：13。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述稳定表达载体的增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物启动子序列的5’侧翼区。

7.如权利要求5所述的方法，其中所述稳定表达载体的增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物启动子序列的3’侧翼区。

8.如权利要求5所述的方法，其中所述增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物表达载体的polyA位点的3’侧翼区。

9.一种用于改善哺乳动物细胞中基因表达载体的效力的方法，所述方法包括在载体中包含富含GC的DNA片段，其中所述载体包含哺乳动物启动子且为稳定表达载体，所述富含GC的DNA片段的序列为SEQ ID No：1或SEQ ID No：13。

10.一种用于哺乳动物细胞中多肽重组生产的稳定表达载体，所述稳定表达载体包括(a)融合到哺乳动物启动子序列的侧翼区的增强该多肽表达的富含GC的DNA片段，该富含GC的DNA片段的序列为SEQ ID No：1或SEQ ID No：13，(b)编码重组多肽的基因序列，(c)polyA位点，(d)增强该多肽表达的富含GC的DNA片段，该富含GC的DNA片段的序列为SEQ ID No：1或SEQ ID No：13，以及(e)pBR322载体骨架。

11.如权利要求10所述的稳定表达载体，其中所述元件(a)的增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物启动子序列的5’侧翼区。

12.如权利要求10所述的稳定表达载体，其中所述元件(a)的增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物启动子序列的3’侧翼区或polyA序列的下游。

13.如权利要求10所述的稳定表达载体，其中所述元件(a)的增强该多肽表达的富含GC的DNA片段融合到哺乳动物表达载体的polyA位点的3’侧翼区。

14.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：4。

15.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：5。

16.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：6。

17.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：7。

18.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：8。

19.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：9。

20.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：10。

21.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：11。

22.如权利要求10所述的稳定表达载体，其包含序列SEQ ID NO：12。