[发明专利]一种用于预防和治疗癌症的包含蜘蛛酶的组合物

说明书

本申请要求2007年12月28日提交的PCT/KR2007/006938的权益， 其内容通过引用的方式全文并入于此。

技术领域

本发明涉及一种用于预防和治疗癌症的包含活性成分蜘蛛酶 (arazyme)的组合物，更确切地，涉及一种预防和治疗癌症的包含 由Aranicolaproteolyticus制备的蜘蛛酶的组合物。

背景技术

肿瘤是由不可控的无序异常细胞增殖发展而来。如果该肿瘤表现 出破坏性的生长、侵入和转移，则被视为是一种恶性肿瘤。侵入的特 性是浸润或破坏周围组织，特别是，形成组织边界的基底层被该特性 破坏，导致肿瘤的局部扩散，且有时会导致肿瘤通过循环系统流入。 转移指肿瘤细胞通过淋巴或血管从原发地扩散至其它区域。从广义上 说，转移还指肿瘤细胞通过浆液性体腔或其它空间的直接扩散。

遗传因素以及后天的环境因素均可导致癌症。而且发达国家具有 更高的癌症发病率。原因可能是食品中残留的农药和杀虫剂量的增 加；包含食品保鲜剂、防腐剂和着色剂的加工食品的消耗量的增多； 水、油和空气污染的增多；现代人压力的增大；活动的减少；以及丰 富饮食的生活导致的肥胖(Kim HJ等Liv Sci of Tj Univ.3：99-130， 1997；Jacobs MM，Nutr Tod，28(3)：19-23，1993)。

血管增生对于肿瘤的生长和转移是必需的(Folkman J，J Natl Cancer Inst，82：4-6，1990)。血管增生可为生长的肿瘤提供营养和氧 气，且使得肿瘤细胞能够从原发性损伤处通过血管壁渗透和转移至远 端的器官(Kim KJ等，自然，362：841-844，1993)。

迄今为止，外科手术、放疗和化疗已被单独或联合用于治疗癌症。 外科手术是一种清除病变组织的方法。因此，特定区域例如胸腔、结 肠和皮肤的肿瘤可以通过外科手术得到有效清除。然而，脊椎骨中的 肿瘤或者像白血病这样的分散性的肿瘤不能通过外科手术合适地治 疗。

化疗阻断细胞的复制或新陈代谢，且已经用于治疗乳腺癌、肺癌 和睾丸癌。然而，通过化疗进行治疗的癌症患者遭受了严重的全身化 疗的副作用。晕动病和呕吐是其中常见但严重的实例。化疗的副作用 可能使患者的适应性迅速下降，因此甚至可以影响患者的生活。此外， DLT(剂量限制性毒性)也是化疗的主要副作用之一，其引起了医学 管理界的密切注意。粘膜炎是针对抗癌剂(例如作为反新陈代谢的细 胞毒性剂的5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤以及抗癌抗生素，例如阿霉素)的 DLT的一个实例实例。如果患者遭受化疗的这种严重副作用，他或她 应该就医，并服用止痛药以减少疼痛。因此，化疗和放疗的副作用是 治疗癌症患者的最大问题。传统的抗癌剂不仅杀死肿瘤细胞，还杀死 普通细胞。因此，最近的研究已经关注于开发可只杀死肿瘤细胞，而 不触及普通细胞的新型抗癌剂。

本发明人试图开发一种新型蛋白酶。结果，发明人从Nephila clavata中分离了这种新型微生物Aranicola proteolyticus HY-3(保藏 号：KCTC 0268BP；WO 01/57222)。并且从该菌株中分离了一种新型 蛋白酶，蜘蛛酶(arazyme)。蜘蛛酶在低温和高盐度时表现出高的 酶活性；尤其在人体温度37℃时表现出最高活性，且在宽的pH范 围内表现出稳定的酶活性。因此，本发明人鉴定了这种具有前景的 新型蛋白酶的基因(WO 01/57222)。

本发明人研究了来自于Aranicolaproteolyticus的蜘蛛酶的作用。 结果，发明人发现蜘蛛酶增加用人肺癌细胞株(A549)移植的裸小 鼠的体重，但抑制该裸小鼠中的肿瘤细胞增长、降低MMP-9，NF-κB 和PCNA表达、降低p21、PCNA(增殖细胞核抗原)、VEGF(血管 内皮生长因子)、p-p38，PKC(蛋白激酶C)和MMP-1(基质金属蛋 白酶-1)表达，但增加在人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231)中过氧化 氢酶的表达。基于这个发现，本发明人通过确认蜘蛛酶可以被有效用 于预防和治疗癌症的组合物完成了本发明。

发明内容

技术问题

本发明的目的是提供一种用于预防和治疗癌症的包含从 Aranicolaproteolyicus中产生的蜘蛛酶的组合物，以及使用该组合物 预防和治疗癌症的方法。

技术方案