[发明专利]检测系统及其应用有效
| 申请号: | 200780049677.2 | 申请日: | 2007-11-09 |
| 公开(公告)号: | CN101657715A | 公开(公告)日: | 2010-02-24 |
| 发明(设计)人: | 凯文·唐纳德·乔治·普夫勒格;路斯·马里·泽贝尔;亨·布恩·西伊;卡琳·安·艾德尼 | 申请(专利权)人: | 戴麦里克斯生物科学有限公司 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/52;G01N33/542;G01N33/68 |
| 代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人: | 程金山 |
| 地址: | 澳大利亚西*** | 国省代码: | 澳大利亚;AU |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 系统 及其 应用 | ||
1.一种用于检测分子缔合的系统,所述系统包括:
i).第一试剂,其包括与第一报道成分偶联的受体形式的第一相互 作用组;
ii).第二试剂,其包括与第二报道成分偶联的第二相互作用组;
iii).第三试剂,其包括受体形式的第三相互作用组;
iv).调控剂,所述调控剂包括调节第三相互作用组的受体的配体; 和
v).检测器;
其中所述第一和第二报道成分的接近产生能够由所述检测器检测的信号; 其中所述第三试剂不包括这样的成分,所述成分能够产生显著干扰和/或有 助于由第一和第二报道成分的接近所产生的信号的信号;其中所述第一相 互作用组与所述第三相互作用组不同;并且其中所述调控剂调控所述第二 相互作用组与所述第三相互作用组的缔合;以使由所述检测器监测由所述 第一和第二报道成分的接近产生的信号组成对所述第一和第三相互作用 组的异源-二聚化和/或寡聚化的监测,其指示所述第一和第三相互作用组 的受体的缔合。
2.按照权利要求1所述的系统,其特征在于所述系统还包括报道成分 引发物,其中仅在存在所述报道成分引发物的条件下,所述第一和第二报 道成分的接近产生能够由所述检测器检测的信号。
3.一种检测分子缔合的方法,所述方法包括下列步骤:
i).提供第一试剂,所述第一试剂包括与第一报道成分偶联的受体 形式的第一相互作用组;
ii).提供第二试剂,所述第二试剂包括与第二报道成分偶联的第二 相互作用组;
iii).提供第三试剂,所述第三试剂包括受体形式的第三相互作用 组,其中所述第一相互作用组与所述第三相互作用组不同;
iv).提供调控剂,所述调控剂包括调节第三相互作用组的受体的配 体;
其中;所述第一和第二报道成分的接近产生信号;其中所述第 三试剂不包括这样的成分,所述成分能够产生显著干扰和/或有 助于由第一和第二报道成分的接近所产生的信号的信号;并且 其中所述调控剂调控所述第二相互作用组与所述第三相互作 用组的缔合;然后
v).检测和/或监测由所述第一和第二报道成分的接近产生的任何 信号;
从而通过所述检测器监测由所述第一和第二报道成分的接近产生的信号 组成监测对所述第一和第三相互作用组的异源-二聚化和/或寡聚化的监 测,其指示所述第一和第三相互作用组的受体的缔合。
4.按照权利要求3的方法,其特征在于,在检测和/或监测由所述第 一和第二报道成分的接近产生的任何信号的步骤之前,所述方法还包括提 供报道成分引发物的步骤,其中仅在存在所述报道成分引发物的条件下, 所述第一和第二报道成分的接近产生能够由所述检测器检测的信号。
5.按照权利要求4的方法,其特征在于,提供报道成分引发物和提供 调控剂的步骤发生于提供所述第一、第二和第三试剂的步骤之后。
6.一种用于确定当第二蛋白与第一蛋白缔合时,测试化合物是否与第 二蛋白相互作用和/或其程度的方法,所述第一蛋白与所述第二蛋白不同, 所述方法包括下列步骤:
a).使所述测试化合物与系统接触,所述系统包括:
i).第一试剂,所述第一试剂包括与第一报道成分偶联的受体形 式的第一蛋白;
ii).第二试剂,所述第二试剂包括与第二报道成分偶联的相互作 用组;
iii).第三试剂,所述第三试剂包括受体形式的所述第二蛋白;
iv).调控剂,所述调控剂包括调节第二蛋白的受体的配体;
其中所述第一和第二报道成分的接近产生信号;并且其中调控剂调控 所述相互作用组与所述第二蛋白的缔合;其中所述第三试剂不包括这 样的成分,所述成分能够产生显著干扰和/或有助于由第一和第二报道 成分的接近所产生的信号的信号;
b).确定信号,作为当所述第二蛋白与所述第一蛋白缔合时,所述测 试化合物是否与所述第二蛋白相互作用和/或其程度的确定。
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