[发明专利]荧光细胞标记物

说明书

技术领域

本发明涉及荧光细胞标记物。本发明特别涉及含有荧光素，BODIPY或者它们的衍生物之一的荧光团的荧光细胞标记物。 

背景技术

化合物荧光素，BODIPY，以及它们的衍生物包含荧光团。 

荧光素是水溶性的。使用荧光素作为细胞标记物要求其结合至活性基团，例如异硫氰酸酯。异硫氰酸荧光素(FITC)的异硫氰酸酯基可以和蛋白质的胺基反应。 

FITC通过与表面表达蛋白质结合，用于标记细胞。被标记的细胞即可以通过荧光-激活细胞分选法(FACS)分类。 

BODIPY的荧光团具有有利的超过荧光素的荧光团的光谱特性。BODIPY的衍生物还通过和表面表达蛋白质结合而用于标记细胞。 

通过荧光团和表面表达蛋白质结合进行细胞标记可能影响细胞功能。此外，细胞膜两维中的荧光团的移动性必然依赖于所结合蛋白质的移动性。 

因此需要有可供选择的细胞标记方法，其可以避免影响细胞功能，并且提供细胞膜两维之中的荧光团的独立的移动性。 

本发明目的在于，提供一种可供选择的细胞标记方法，或者至少提供一种有用的选择。 

发明内容

本发明第一方面提供一种荧光细胞标记物，结构为： 

F-S₁-S₂-L 

其包括亚结构： 

其中 

F是荧光团； 

S₁-S₂是连接F至L的间隔团； 

L是选自二酰基-与二烷基-甘油酯的脂，包括甘油磷脂； 

m与n各自为3至6； 

R₁是O或者S；以及 

*不为H。 

选择间隔团(S₁-S₂)，以提供水溶性的细胞标记物。 

优选地，F选自下组：荧光素、俄勒冈绿、宾夕法尼亚绿、东京绿、曙红、BODIPY、BODIPY TR、Alexa Fluor350、Alexa Fluor405、Alexa Fluor488、Alexa Fluor568、Alexa Fluor594、德克萨斯红、萤光黄、四甲基若丹明和它们的衍生物的荧光团。最优选地，F选自下组：荧光素、BODIPY和它们的衍生物的荧光团。 

优选地，m与n之和为6至9，且*是C或者N。 

优选地，当F是荧光素或者其衍生物之一的荧光团，则S₁是选自1，3-二氨基丙基、1，4-二氨基丁基或者1，5-二氨基戊基衍生物的C_3-5-二氨基烷基衍生物。更优选地，当F是荧光素或者其衍生物之一的荧光团，则S₁是C_3-5-氨基烷基硫脲基(aminoalkylthioureidyl)。最优选地，当F是荧光素或者其衍生物之一的荧光团，S₁是5-((5-氨基戊基)硫脲基。 

优选地，当F是荧光素或者其衍生物之一的荧光团，则S₂选自下组：-CO(CH₂)₃CO-，-CO(CH₂)₄CO-(己二酸酯)，-CO(CH₂)₅CO-，和-CO(CH₂)₅NHCO(CH₂)₅CO-。更优选地，当F是荧光素或者其衍生物之一的荧光团，则S₂是-CO(CH₂)₄CO-(己二酸酯)。 

优选地，当F是荧光素或者其衍生物之一的荧光团，该结构包括亚结构： 

或者 

其中m和n各自为3至5，且*不为H。 

优选地，当F是BODIPY或者其衍生物之一的荧光团，则S₁是3-5-alkionyldiamine。更优选地，如果F是BODIPY或者其衍生物之一的荧光团，则S₁是丙酰基乙二胺。 

优选地，当F是BODIPY或者其衍生物之一的荧光团，则S₂选自：