[发明专利]制备抗耐药性抗原的活性抗体的方法、所述方法获得的抗体及其用途

权利要求书

1.一种用于制备针对耐药肿瘤表面表达的肿瘤抗原，但不针对耐 药肿瘤的原生肿瘤的表面表达的抗原的抗体或抗体的一个功能片段的 方法，其中该方法包含下述步骤：

i）以来自耐药肿瘤的磨碎的组织匀浆和/或悬浮液和/或细胞裂解液 直接免疫接种动物，

ii）将来自所述免疫动物的脾细胞与骨髓瘤细胞融合以获得杂交 瘤，和

iii）利用鉴别性免疫组织化学选择分泌特异性识别在耐药肿瘤的肿 瘤细胞表面表达且其表达由抗肿瘤治疗诱导的抗原而不识别产生耐药 肿瘤的原生肿瘤的抗体的杂交瘤，

其中所述来自对至少一种抗肿瘤化合物耐药的肿瘤的磨碎的组织 匀浆和/或悬浮液和/或细胞裂解液已经预先利用包含下述步骤的方法 制备：

a)选择全部或部分的原生肿瘤，并将其移植入动物体内；

b)以至少一种抗肿瘤化合物处理部分该移植动物；

c)自步骤a)中接受移植但未接受处理的动物体内取出全部或部分 的原生肿瘤；

d)自步骤b)中接受处理的动物体内取出全部或部分耐药肿瘤；

e)制备鉴别选择分别来自步骤c)和d)中取出的全部或部分肿瘤的 抗体的手段；和

f)制备步骤d)中取出的全部或部分耐药肿瘤的磨碎的组织匀浆和 /或细胞裂解液；且

其中所述方法在步骤i）前包括额外的使用免疫抑制化合物进行的 耐受步骤。

2.一种用于制备针对耐药肿瘤表面表达的肿瘤抗原，但不针对耐 药肿瘤的原生肿瘤的表面表达的抗原的抗体或抗体的一个功能片段的 方法，其中该方法包含下述步骤：

i）以来自耐药肿瘤的磨碎的组织匀浆和/或悬浮液和/或细胞裂解液 直接免疫接种动物，

ii）将来自所述免疫动物的脾细胞与骨髓瘤细胞融合以获得杂交 瘤，和

iii）利用鉴别性免疫组织化学选择分泌特异性识别在耐药肿瘤的肿 瘤细胞表面表达且其表达由抗肿瘤治疗诱导的抗原而不识别产生耐药 肿瘤的原生肿瘤的抗体的杂交瘤，

其中所述来自对至少一种抗肿瘤化合物耐药的肿瘤的磨碎的组织 匀浆和/或悬浮液和/或细胞裂解液已经预先利用包含下述步骤的方法 制备：

a)选择肿瘤细胞系，并将其移植入动物体内；

b)以至少一种抗肿瘤化合物处理部分该移植动物；

c)自步骤a)中接受移植但未接受处理的动物体内取出全部或部分 的原生肿瘤；

d)自步骤b)中接受处理的动物体内取出全部或部分耐药肿瘤；

e)制备鉴别选择分别来自步骤c)和d)中取出的全部或部分肿瘤的 抗体的手段；和

f)制备步骤d)中取出的全部或部分耐药肿瘤的磨碎的组织匀浆和 /或细胞裂解液；且

其中所述方法在步骤i）前包括额外的使用免疫抑制化合物进行的 耐受步骤。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述免疫接种通过腹 腔注射和/或皮下注射和/或静脉注射和/或脾内注射进行。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述耐药肿瘤通过将 肿瘤细胞系和/或全部或部分人的肿瘤移植到动物体内，然后对动物使 用期望其诱导原生肿瘤产生耐药性的抗肿瘤化合物而诱导产生。

5.根据权利要求1的方法，其特征在于所述原生肿瘤选自任何明 确对治疗耐药的肿瘤。

6.根据权利要求5的方法，其特征在于所述原生肿瘤选自肺、结 肠、前列腺、乳腺和卵巢肿瘤细胞系和/或原生肿瘤。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述至少一种抗肿瘤 化合物是化学疗法制剂。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述至少一种抗肿瘤 化合物选自化学分子。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述至少一种化学分 子选自激素疗法制剂。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述化学分子是酪 氨酸激酶抑制剂或抗体。