[发明专利]保质期延长及增强种上稳定性的液体细菌接种剂

说明书

相关申请

本申请是2004年12月23日提交的专利申请号为11/020,714的部分继续申请，该申请的全部内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明涉及液体接种剂，尤其涉及一种提高液体接种剂中细菌在包装容器内和施用于种子之后的存活和稳定性的方法。

背景技术

据我们所知，对植物有益的微生物种类繁多，它们包括根瘤菌(Rhizobium)(包括慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium))、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙雷氏菌属(Serratia)、杆菌属(Bacillus)(包括类芽胞杆菌属(Paenibacillus))、巴斯德氏菌属(Pasteuria)、固氮菌属(Azotobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、固氮螺菌属(Azospirillum)、甲基杆菌属(Methylobacterium)、蓝细菌(Cyanobacteria)(蓝绿藻(blue-green algae))等细菌和菌根真菌(mycorrhizal fungae)。利用接种剂组合物可以将这些微生物导入植物。制备接种剂组合物的方法包括通常在营养培养基中使微生物发酵的步骤。

可以直接将接种剂组合物施到植物种子上，也可以在播种前将其尽速施到犁沟内。往种子或土壤内接种有益微生物以提高产量的做法已风行多年。但得到的结果却往往变化不一，波动起伏，其原因可能是由于接种剂活性丧失，或者接种剂活性变化而导致剂量变化所致。

播种时，无论将接种剂施到犁沟内还是种子内，接种剂内的微生物都来不及适应新环境。所以接种剂中的微生物的存活可能较低。

为提高接种剂中微生物活性，目前的通行做法是，将接种剂加到种子内或播种时，往接种剂内添加糖或聚合物等补充剂。由于这些补充剂是在接种剂装到容器之后才添加的，所以它们对装在容器内的接种剂的存活状态和稳定性并不产生效果。

另外，往种子内加入接种剂或播种时添加补充剂不仅劳神费事，而且通常还得该接种剂的终端用户(如农民)在无法操控的环境下(如谷仓或农田)亲力亲为。所以在使用补充剂时往往会操作不当。

为克服在接种剂制备好之后添加补充剂所引起的种种问题，还有一种做法就是，在制备液体接种剂的发酵阶段之前将补充剂加到营养培养基中。但是，在发酵前按最适宜接种剂在种上(on seed)存活的量加入补充剂时，微生物的生长却受到抑制。

所以，需要发明一种方法来提高储存期间液体接种剂中微生物(如细菌)的存活和稳定性，以及液体接种剂施到种子上之后微生物的种上存活和稳定性。

发明内容

本发明的一个实施例是关于制备含干燥剂的液体接种剂产品的方法。该方法包括提供细菌生长已达到近稳定期(substantiallystationary phase)的液体接种剂。将含有干燥剂的干燥处理剂加到液体接种剂中制得半干燥接种剂(partially desiccatedinoculant)产品。

本发明的另一实施例中，将半干燥接种剂包装后储存。

本发明的再一实施例中，将半干燥接种剂施到种子上。

附图说明

图1是表示本发明的几个实施例中，液体肉汤中慢生大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)的存活情况与时间、温度之间的函数关系图。

图2是表示本发明的几个实施例中，液体肉汤中慢生大豆根瘤菌的存活情况与时间、温度之间的函数关系图。

图3是表示本发明的几个实施例中，慢生大豆根瘤菌的种上存活情况与时间、温度之间的函数关系图。

图4是表示本发明的几个实施例中，液体肉汤中慢生大豆根瘤菌的存活情况与干燥剂类型和用量之间的函数关系图。

图5是表示本发明的几个实施例中，液体肉汤中慢生大豆根瘤菌的存活情况与干燥剂类型和用量之间的函数关系图。

图6是表示本发明的几个实施例中，慢生大豆根瘤菌的种上存活情况与干燥剂类型和用量之间的函数关系图。

图7是表示本发明的几个实施例中，液体肉汤中荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的存活情况与干燥剂类型和用量之间的函数关系图。

图8是表示本发明的几个实施例中，液体肉汤中Sproteomaculans的存活情况与干燥剂类型和用量之间的函数关系图。

图9是表示本发明的几个实施例中，慢生大豆根瘤菌群和时间之间的函数关系图。

图10是表示本发明的几个实施例中，慢生大豆根瘤菌群和时间之间的函数关系图。