[发明专利]用于鉴定RGS21活性调节子的方法、包含RGS21调节子的组合物以及用其调节味觉的方法

权利要求书

1、一种鉴定特异性调控G-蛋白信号21调节子(RGS21)蛋白的活性的化合 物的方法，包含：

a)制备分离的RGS21蛋白或其生物学活性片段，以及分离的Gα蛋白；

b)在缺少和存在测试化合物的条件下将分离的RGS21蛋白或其生物学活性 片段与分离的Gα蛋白组合；以及

c)在缺少和存在测试化合物的条件下测定RGS21 GTP酶活化蛋白(GAP)对 于分离的Gα蛋白的活性水平；以及

d)鉴定调控RGS21 GAP活性水平的测试化合物。

2、权利要求1所述的方法，其中分离的Gα蛋白选自由α-味蛋白、Gαi1、 Gαi2、Gαi3、Gαz、Gαo、Gαs、Gαolf、Gαt、Gαq、Gαl1、Gαl2、Gα l3、Gαl4和Gαl6组成的组。

3、权利要求1所述的方法，其中分离的Gα蛋白是α-味蛋白。

4、权利要求1所述的方法，其中RGS21蛋白、Gα蛋白或两种蛋白都分离自 味觉细胞。

5、权利要求1所述的方法，其中RGS21蛋白、Gα蛋白或两种蛋白都分离自 选自由细菌细胞、昆虫细胞、酵母细胞和哺乳动物细胞所组成的组的细胞。

6、权利要求1所述的方法，其中通过测量GTP的水解量来测定RGS21 GAP活 性，其中用放射性标记或荧光标记来标记GTP。

7、权利要求6所述的方法，其中通过测量释放入上清液的放射性标记的无 机磷酸盐(³²P_i)的量来测定RGS21 GAP活性。

8、权利要求6所述的方法，其中由荧光光谱测定RGS21 GAP活性。

9、权利要求6所述的方法，其中由时间分辨的荧光共振能量转移(TR-FRET) 试验测定RGS21 GAP活性。

10、一种鉴定特异性调控G蛋白信号21调节子(RGS21)蛋白活性的化合物 的方法，包含：

a)制备表达RGS21蛋白或其生物学活性片段以及Gα蛋白的宿主细胞；

b)用测试化合物接触宿主细胞；

c)测定在宿主细胞中的RGS21活性水平；以及

d)鉴定调控细胞中RGS21活性水平的化合物。

11、权利要求10所述的方法，其中G α蛋白选自由α-味蛋白、Gαi1、Gα i2、Gαi3、Gαz、Gαo、Gαs、Gαolf、Gαt、Gαq、Gαl1、Gαl2、Gαl3、 Gαl4和Gαl6组成的组。

12、权利要求10所述的方法，其中Gα蛋白是α-味蛋白。

13、权利要求10所述的方法，其中所述宿主细胞是味觉细胞。

14、权利要求13所述的方法，其中所述味觉细胞是选自由STC-1细胞、 NCI-H716细胞或HuTu-80肠内分泌细胞所组成的组的典型味觉细胞。

15、权利要求10所述的方法，其中所述宿主细胞是人HuTu-80肠内分泌细胞。

16、权利要求13所述的方法，其中所述味觉细胞来源于人味蕾细胞。

17、权利要求10所述的方法，其中所述宿主细胞选自由细菌细胞、昆虫细 胞、酵母细胞和哺乳动物细胞所组成的组。

18、权利要求10所述的方法，其中所述宿主细胞是自然表达功能性味觉受 体、G蛋白、RGS21蛋白和效应子的真核细胞。

19、权利要求18所述的方法，其中所述功能性味觉受体选自由甜味剂受体、 苦味受体和鲜味受体所组成的组。

20、权利要求18所述的方法，其中所述效应子是磷脂酶Cβ2(PLCβ2)。

21、权利要求10所述的方法，其中通过测定细胞中胞内第二信使的水平来 测定RGS21活性的水平。