[发明专利]疾病治疗方法

说明书

本发明涉及医学领域，尤其涉及包括施用含遗传材料的制剂的治疗 方法，并可用于治疗与染色体缺陷相关的血细胞生成受损以及由使用细 胞生长抑制剂或高剂量辐射的疗法所引起的后续血液干细胞(BSC)死 亡；用于治疗与BSC朝向特定造血元件分化而不分裂的基本机制损伤 相关的疾病，所述疾病在由造血细胞恶性转化所导致的成血细胞增多 (hemoblastoses)中发生，所述转化使得它们不能正常分化，并引起其失 控的分化；和用于治疗由干细胞(SC)中染色体缺陷所引起的疾病，其治 疗需要在体内出现遗传上、表型上和生理上健康的SC。

已知一种基于细胞中点突变修复的治疗方法[1998年8月18日的美 国专利no.5,795,972]。

该方法显示相对低的治疗效力并且施用范围有限，因为其要求在开 始治疗前精确地确定突变。

因为仍然缺乏特定突变是癌症起因的可靠证据，所以开发上述方法 需要仔细和长期的研究来检测需要修正的特定突变，从而使得必须开发 这样的方法，所述方法可应用于对癌症起因已经有所了解、但不强调基 因组中诱导恶性化的具体改变的情形之下。

还已知涉及局部施用DNA片段用于治疗患者皮肤癌前状态的方法 [1999年9月21日的美国no.5,955,059；1995年11月28日的美国no. 5,470,577]。

这些方法的可应用性是有限的，因为相应专利中既未指明具体的 DNA序列也未指明DNA来源。它们提出使用来自“任何适当来源”的天 然和合成的DNA，例如长度为200bp下至单核苷酸和核苷的鲑鱼DNA， 包括二聚体，根据该作者进行的测试所述二聚体是最为有效的。然而， 对人类机体施用外源DNA的效用和后果仍待详细研究，这就预先决定 了应用这些方法的某些危险。

本质上与所提出方法最接近的是基于施用Polydan制剂的方法，所 述Polydan制剂是产自鲟鱼精的DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖 核酸)衍生物与多氯水合物(polychlorohydrate)钠盐的高度纯化的标准 化混合物，其作为制剂的缓慢(持续1.5-2分钟)的皮下或肌内注射剂 施用，所述制剂在手中的管里预先加热至患者的体温[注册号no. 95/292.8；注册号000552/01-2001]。

这一最接近设计的缺点是应用领域有限，因为该制剂的活性物质从 异种(xenogeneic)生物的组织中分离并含有DNA和RNA两种分子。尽 管制剂Polydan的活性物质以与人DNA类似的方式作用于BSC基因组 (即，由于递送至核的DNA片段双链断裂的存在而模拟染色体断裂的 存在，从而激活BCS进行终末分化，并且由于Polydan制剂的DNA和 人染色体DNA之间的部分同源性而为同源重组事件和保持染色体物理 长度和结构足以进行连续的有丝分裂链创造条件)，但是Polydan制剂 的物质还是向受体基因组中引入外源序列。

制剂Polydan的这种作用通过恢复和保持BSC染色体的功能性大小 而修复BSC的造血功能，并且推测其不影响分化血细胞总体而言高度 特化的特性，同时通过其模拟作用激活所述血细胞分化；尽管如此，不 能认为这样修复的BSC完全恢复成其初始遗传状态，因为涉及受与外 源遗传材料的重组影响的染色体基因座的任何其他分化方向会必然导 致该BSC发育途径中的缺陷。在这些重组期间内部染色体结构变为完 全不可预测的，并且尚未研究用外源DNA制剂刺激白细胞的长期后果。

待解决的问题在于将片段化DNA的应用范围扩展至以下用途：治 疗与染色体缺陷相关的血细胞生成受损和随后的BSC死亡(例如在使 用细胞生长抑制剂或高辐射剂量的疗法中)；治疗与涉及BSC向特定造 血元件分化而不分裂的基本机制受损相关的疾病，这在由造血细胞恶性 转化导致的成血细胞增多中发生，所述转化使得这些细胞不能正常分化 并引起其失控的增殖；以及用于治疗由干细胞(SC)染色体缺陷引起的疾 病，所述疾病的治疗依赖于在体内出现遗传上、表型上和生理上健康的 SC。

需要的结果通过将片段化DNA引入患者体内来实现；另外，所述 片段化DNA是同种异体的(allogeneic)并由下述片段组成，所述片段具 有1-10个核小体单元的长度并与核基质蛋白相组合组成患者的完整基 因组；该片段化DNA以等于或高于患者血浆和组织液中含有的DNA 量但是不高于1500ng/mL的用量施用。