[发明专利]通过可逆乙酰化调节蛋白质活性

权利要求书

1.一种鉴定提高SIRT3多肽水平或脱乙酰酶活性的物质的方法，该方法 包括以下步骤：

(a)使表达SIRT3多肽和乙酰-CoA合成酶2(AceCS2)多肽的细胞与候选物 质接触；和

(b)如果有作用，则测定候选物质对细胞中乙酰化AceCS2水平的作用。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)包括利用乙酰化 AceCS2的特异性抗体的免疫学试验。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞是哺乳动物细胞。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述哺乳动物细胞选自下组： 心脏细胞、肌肉细胞和脑细胞。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述哺乳动物细胞是人细胞。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括以下步骤：

(c)鉴定所述候选物质的结构或序列。

7.一种鉴定提高SIRT3多肽水平或脱乙酰酶活性的物质的方法，该方法 包括以下步骤：

(a)使包含NAD⁺的试验混合物中的SIRT3多肽和乙酰化的乙酰-CoA合 成酶2(AceCS2)多肽与候选物质接触，和

(b)如果有作用，则测定候选物质对试验混合物中乙酰化AceCS2水平的 作用；

其中与未用所述候选物质处理的试验混合物中乙酰化AceCS2的第二水平 相比，试验混合物中乙酰化AceCS2的第一水平降低表明该物质提高SIRT3多 肽的水平或脱乙酰酶活性。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，乙酰化AceCS2多肽包含¹⁴C- 标记的乙酰基，通过检测¹⁴C-标记乙酰基的释放实施步骤(b)。

9.一种鉴定调节乙酰-CoA合成酶2(AceCS2)多肽水平、乙酰化状态或活 性的物质的方法，该方法包括以下步骤：

(a)使表达AceCS2多肽的细胞与候选物质接触，和

(b)如果有作用，则测定候选物质对细胞中AceCS2的水平、乙酰化状态 或活性的作用。

10.一种鉴定调节乙酰-CoA合成酶2(AceCS2)多肽水平、乙酰化状态或活 性的物质的方法，该方法包括以下步骤：

(a)使试验混合物中的AceCS2多肽与候选物质接触，和

(b)如果有作用，则测定候选物质对试验混合物中AceCS2的水平、乙酰 化状态或活性的作用。

11.一种通过权利要求1所述方法鉴定的生物学活性物质。

12.一种通过权利要求9所述方法鉴定的生物学活性物质。

13.一种调节乙酰-CoA合成酶2(AceCS2)多肽的乙酰化状态的方法，该方 法包括使表达AceCS2多肽的细胞与按照权利要求1所述方法可获得的物质接 触的步骤。

14.一种调节乙酰-CoA合成酶2(AceCS2)多肽的乙酰化状态的方法，该方 法包括使表达AceCS2多肽的细胞与按照权利要求9所述方法可获得的物质接 触的步骤。

15.一种治疗个体的病理学状态的方法，该方法包括将治疗有效量的提高 SIRT3多肽水平或脱乙酰酶活性的物质给予个体的步骤；

其中SIRT3使AceCS2脱乙酰化；

其中所述病理学状态的特征在于乙酸水平升高；和

其中所述病理学状态得到治疗。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述病理学状态选自下组： II型糖尿病、高胆固醇血症、高脂血症和肥胖症。

17.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述个体是人或非人动物。