[发明专利]白细胞介素-1α免疫诱导预防动脉粥样硬化的自身抗体

说明书

【0001】本申请要求2006年5月15日提交的序列号60/800,029的权 益，并通过引用将其引入。

发明背景

【0002】白细胞介素-1α(IL-1α)被很好地表征为炎症的主要介质 (primary mediator)，并且其在炎症相关疾病中的作用已在几个动物模型 中得到暗示。在普通人群中已经相对较高频率地检测到抗白细胞介素 (IL)-1α的人IgG自身抗体(autoantibodies，aAb)。事实上，据报道20％以 上的表面健康的人具有高度特异性的IL-1αaAb。虽然对携带天然IL-1α aAb的男性的观察已表明内源性IL-1α的中和性在降低炎症相关疾病—— 如动脉粥样硬化或风湿性关节炎——进展风险中的作用，但是，这些研 究没有排除在这些个体内存在其它的自身抗体，并且，一直难以建立因 果关系，这些抗IL-1α抗体的生理作用还没有明确确定。

附图简述

【0003】图1C57BL/6小鼠三次皮下注射在明矾中的IL-1α-PPD偶联 物后，在第56天在C57BL/6小鼠中抗IL-1α自身抗体的形成(◆)。对照小 鼠仅用在明矾中的PPD免疫(■)。

【0004】图2抗体依赖性补体介导的EL-4细胞杀伤。EL-4细胞与连 续稀释的小鼠抗小鼠IL-1α多克隆抗血清一起温育。死亡细胞与活细胞的 比例与血清浓度成正比。人抗小鼠IL-1α单克隆抗体作为阳性对照。与幼 鼠血清温育或仅与培养基温育作为两个阴性对照。

发明详述

【0005】ApoE-/-小鼠具有工程改造的脂类运输缺陷(lipid transport defect)，该脂类运输缺陷导致在主动脉中动脉粥样硬化样斑块的快速发 展。这些小鼠被认为是人类动脉粥样硬化最有说服力的模型(most compelling model)，因为它们是高胆固醇血的，并自然地发展成动脉病 变。ApoE-/-小鼠也因此被广泛用作研究动脉粥样硬化和进行治疗的模型 系统。

【0006】本发明提供了IL-1α的抗体中和的动物模型，其可通过例如 对ApoE-/-小鼠进行抗IL-1α的免疫来获得。所有被免疫的动物会产生抗 IL-1α的IgG aAb，其会保持在高水平。来源于免疫小鼠血清的IL-1α aAb 抑制IL-1α与IL-1α反应性鼠T细胞系NOB-1的结合，并在体内中和IL-1α (而不是IL-1β诱导的IL-6)。

【0007】被喂食高脂肪饮食的对照ApoE-/-小鼠在主动脉里形成动脉 粥样硬化样病变。该病变的标志是巨噬细胞浸润、坏死性核和具有不同 量细胞外基质的平滑肌细胞增殖。与此相比，进行抗IL-1α免疫的ApoE-/- 动物，其动脉粥样硬化病变的水平已大幅度降低，并产生惊人的对动脉 粥样硬化进展的抗性。在免疫前已具有脂肪纹(动脉粥样硬化病变的开 始)的小鼠中，用IL-1α免疫可以阻止动脉粥样硬化病变的发展，以使血 管床保持基本健康。

【0008】在通过免疫产生的内源性IL-1α自身抗体存在的情况下， ApoE-/-小鼠得以良好预防动脉粥样硬化相关疾病(如外周缺血性心脏病、 冠状动脉疾病、脑血管疾病和外周动脉的疾病(peripheral arterial disease))。因此，本发明提供了精致的动物模型(elegant animal model)， 其支持我们以前的临床观察：具有天然IL-1α aAb的男性与不具有中和性 IL-1α aAb的男性相比，具有降低的动脉粥样硬化相关心脏疾病发病率。

【0009】由于已经发现天然产生IL-1α aAb的人发生动脉粥样硬化的 风险较小，所以很可能天然IL-1α aAb可在中和血管内皮细胞中的IL-1α有 害炎症作用方面发挥生理作用。因此，本发明还提供了治疗个体的方法， 所述个体包括人类，其处于动脉粥样硬化相关疾病(如外周缺血性心脏 病、冠状动脉疾病、脑血管疾病和外周动脉的疾病)发生的风险下，该 方法是通过诱导对抗这些疾病的保护性IL-1α自身抗体实现的。在大约20 ％没有明显的健康缺陷的人群中临床观察到IL-1α自身抗体，表明施用抗 IL-1α的中和性自身抗体不会造成健康风险。此外，IL-1α敲除小鼠也显然 是健康的，其支持了这种方法是安全的。因此，在人体内诱导IL-1α aAb 是降低动脉粥样硬化相关疾病的风险和严重性的安全有效的方法。