[发明专利]醛缩酶、编码它们的核酸及制备和使用它们的方法

权利要求书

1.分离的，合成的或重组的核酸，其编码具有醛缩酶活性的多肽，所述核酸 为：

(a)SEQ ID NO：275；

(b)编码SEQ ID NO：276的序列的核酸；

(c)与(a)或(b)互补的核酸序列。

2.权利要求1所述的核酸，其中所述醛缩酶活性是丙酮酸醛缩酶活性。

3.权利要求1所述的核酸，其中所述醛缩酶活性是HMG醛缩酶活性。

4.权利要求1所述的核酸，其中所述醛缩酶活性是KHG醛缩酶活性。

5.表达盒，其包括权利要求1中所述的核酸。

6.权利要求5所述的表达盒，其中所述表达盒是载体。

7.权利要求6所述的表达盒，其中所述载体是克隆载体。

8.权利要求7所述的表达盒，其中所述克隆载体是病毒载体、质粒或人工染 色体。

9.权利要求8所述的表达盒，其中所述病毒载体是噬菌体。

10.权利要求9所述的表达盒，其中所述噬菌体是噬菌粒或细菌噬菌体。

11.权利要求8所述的表达盒，其中所述质粒是粘粒。

12.权利要求11所述的表达盒，其中所述粘粒是F粘粒。

13.权利要求8所述的表达盒，其中所述病毒载体选自腺病毒载体或反转录 病毒载体，或所述人工染色体包括细菌人工染色体、细菌噬菌体P1-衍生的载体或 哺乳动物人工染色体。

14.转化的细胞，其包括权利要求1中所述的核酸，或包括权利要求5-7中 任一项所述的表达盒，其中所述细胞选自细菌细胞、哺乳动物细胞、真菌细胞、 昆虫细胞或植物细胞。

15.分离的、合成的或重组的多肽，其具有醛缩酶活性，所述多肽为下列氨基 酸序列中所述的多肽：

(a)氨基酸序列SEQ ID NO：276；

(b)由权利要求1所述核酸编码的氨基酸序列。

16.权利要求15所述的分离的、合成的或重组的多肽，其中所述醛缩酶活性 包括丙酮酸醛缩酶活性。

17.权利要求15所述的分离的、合成的或重组的多肽，其中所述醛缩酶活性 包括HMG醛缩酶活性。

18.权利要求15所述的分离的、合成的或重组的多肽，其中所述醛缩酶活性 包括KHG醛缩酶活性。

19.包含权利要求15中所述多肽的蛋白制剂，其中所述蛋白制剂是液体、固 体或凝胶。

20.制备转基因植物的方法，包括：

(a)向所述细胞中引入权利要求1所述的核酸，由此产生转化的植物细胞；

(b)从所述转化的植物细胞产生转基因植物，

其中步骤(a)进一步包括通过植物细胞原生质体的电穿孔或显微注射导入所 述核酸，

并且步骤(a)包括通过DNA微粒轰击或通过使用根瘤农杆菌宿主将所述核 酸直接导入植物组织中。

21.在植物细胞中表达权利要求1所述的核酸的方法，包括：

(a)用可操作地连接到启动子的权利要求1中所述的核酸转化所述植物细胞；

(b)在所述植物细胞表达所述核酸的条件下培养所述植物。

22.在组合物中切割碳-碳键的方法，包括以下步骤：

(a)提供权利要求15到18中任一项所述的多肽，或由权利要求1到4中任 一项所述核酸编码的所述多肽；

(b)提供包含碳-碳键的组合物；和

(c)在所述多肽切割所述组合物中所述碳-碳键的条件下，使步骤(a)所述的多 肽与步骤(b)所述的组合物接触，

其中所述多肽具有丙酮酸醛缩酶、HMG醛缩酶和/或KHG醛缩酶活性。