[发明专利]吡咯并喹啉醌依赖性可溶性葡萄糖脱氢酶的改良突变体

权利要求书

1.与麦芽糖相比对葡萄糖具有提高的特异性的PQQ依赖性可溶 性葡萄糖脱氢酶的突变体，其中所述突变体基于SEQIDNO：2所示的 醋酸钙不动杆菌(Acinetobactercalcoaceticus)s-GDH野生型序列进行 突变，且其中所述突变体为

D87R+N122K+S124K+S146G+L169F+Y171G+E245D+Q246H+V29 8L+M341V+T348S+L386F+ins429P；

D87R+N122K+S124K+S146G+L169F+Y171G+E245D+Q246H+V29 8L+G339T+M341V+T348G+L386F+ins429P；

D87R+N122K+S124K+S146G+L169F+Y171G+E24SD+Q246H+V29 8L+M341V+T348S+L386F+ins429P+V436P；

D87R+N122K+S124K+S146G+L169F+Y171G+E245D+Q246H+V29 8L+M341V+T348S+V349G+A354T+L386F+ins429P；或

D87R+L110H+N122K+S124K+S146G+L169F+Y171G+E245D+Q24 6H+V298L+M341V+T348S+L386F+ins429P。

2.编码根据权利要求1的可溶性葡萄糖脱氢酶突变体的分离多 核苷酸。

3.表达载体，其包括权利要求2中限定的分离多核苷酸，该分离 多核苷酸可操作连接能够促进所述多核苷酸在宿主细胞中表达的启动 子序列。

4.包括权利要求3的表达载体的宿主细胞。

5.用于产生可溶性葡萄糖脱氢酶突变体的方法，所述方法包括在 适于可溶性葡萄糖脱氢酶突变体产生的条件下培养权利要求4的宿主 细胞。

6.表达载体，其包括权利要求2中限定的分离多核苷酸，该分离 多核苷酸可操作连接能够促进其在无细胞肽合成系统中表达的启动子 序列。

7.在适于产生所述可溶性葡萄糖脱氢酶突变体的条件下在无细胞 肽合成系统中使用权利要求6的构建体产生可溶性葡萄糖脱氢酶突变 体的方法。

8.根据权利要求1的可溶性葡萄糖脱氢酶突变体在制备用于检 测、测定或测量样品中葡萄糖的装置中的用途。

9.权利要求8的用途，进一步的特征在于使用传感器或试条装置 进行所述葡萄糖的检测、测定或测量。

10.用于检测或测量样品中葡萄糖的装置，其包括根据权利要求1 的可溶性葡萄糖脱氢酶突变体和所述测量需要的其它试剂。