[发明专利]恙虫病诊断制剂

权利要求书

1.恙虫病的诊断试剂盒，包括测试条带，以检测生物样品中抗恙虫抗原的抗 体，其中所述测试条带包括：

(a)吸收所述样品的样品垫；

(b)与所述样品中人类抗体结合的金结合垫；

(c)测试膜，包括含有恙虫混合抗原的测试线和含有对照蛋白的对照线；及

(d)吸收剩余样品的吸收垫，

其中所述恙虫混合抗原包含东方恙虫Gilliam、Karp和Kato菌株的56kDa融 合蛋白，东方恙虫Kangwon菌株的56kDa蛋白，和东方恙虫Boryong菌株的21kDa 蛋白，并且

其中所述东方恙虫Kangwon菌株的56kDa蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：3 所示的，以及所述东方恙虫Boryong菌株的21kDa蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：6所示的。

2.根据权利要求1所述的诊断试剂盒，进一步包括预测试线，其被置于所述 测试膜上的所述测试线之前，其中所述预测试线包含不表达恙虫抗原蛋白的大肠 杆菌提取物。

3.根据权利要求2所述的诊断试剂盒，其中所述测试膜包含所述预测试线、 所述测试线与所述对照线，其中所述预测试线邻近所述样品垫放置，所述对照线 邻近所述吸收垫放置，并且所述测试线置于所述预测试线和所述对照线之间。

4.根据权利要求2所述的诊断试剂盒，其中0.5mg/ml到0.6mg/ml的所述大 肠杆菌提取物被吸收在所述预测试线中。

5.根据权利要求1或2所述的诊断试剂盒，其中存在1mg/ml的所述恙虫混 合抗原和0.1mg/ml到1mg/ml的所述对照蛋白。

6.根据权利要求1所述的诊断试剂盒，其中所述东方恙虫Gilliam、Karp和 Kato菌株的56kDa融合蛋白，所述东方恙虫Kangwon菌株的56kDa蛋白，和所述 东方恙虫Boryong菌株的21kDa蛋白分别以1mg/ml的浓度制备，并且以5∶2∶1的 体积比混合，以制备1mg/ml的恙虫混合抗原。

7.根据权利要求1或2所述的诊断试剂盒，其中所述对照蛋白是兔抗山羊IgG 多克隆抗体和/或山羊抗人IgM多克隆抗体。

8.根据权利要求1或2所述的诊断试剂盒，其中所述金结合垫包括至少一种 选自金标记的蛋白A、金标记的抗人IgG抗体和金标记的抗人IgM抗体的标记物。

9.根据权利要求1或2所述的诊断试剂盒，其中所述人类抗体是IgG或IgM。

10.根据权利要求2所述的诊断试剂盒，其中所述膜的所述预测试线、所述 测试线和所述对照线以2.5到3.0mm的间隔排列。

11.恙虫病的诊断试剂盒，包含在一个塑料装置中连接的两条权利要求1所 述的测试条带，其为从样品垫分开的第一条带和第二条带，其中所述第一条带用 于检测抗所述恙虫抗原蛋白的人IgG抗体，所述第二条带用于检测抗所述恙虫抗 原蛋白的人IgM抗体，所述第一条带包括含有山羊抗人IgG抗体或蛋白A的金结 合垫和含有兔抗山羊IgG多克隆抗体的对照线，并且所述第二条带包括含有山羊 抗人IgM抗体的金结合垫和含有山羊抗人IgM多克隆抗体的对照线。

12.根据权利要求11所述的诊断试剂盒，其中所述第一条带和第二条带顺序 或平行连接。

13.恙虫病的诊断组合物，包括作为恙虫混合抗原的东方恙虫Gilliam、Karp 和Kato菌株的56kDa融合蛋白，东方恙虫Kangwon菌株的56kDa蛋白，和东方 恙虫Boryong菌株的21kDa蛋白，

其中所述东方恙虫Kangwon菌株的56kDa蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：3 所示的，以及所述东方恙虫Boryong菌株的21kDa蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：6所示的。