[发明专利]一株防治温室刺吸式害虫的高效菌株及其制剂

说明书

技术领域

本发明属于害虫生物防治技术领域，涉及一株虫生真菌菌株—蜡蚧轮枝菌Vertillium lecaniiCA190404，CGMCC1126及其制剂，可用于防治温室刺吸式害虫—粉虱、蚜虫、蓟马，可用于无公害蔬菜和绿色食品蔬菜生产。

背景技术

随着社会的发展和人们生活水平的提高，人们对食品质量的要求越来越高。无公害食品和绿色食品的生产已成为了目前农业生产的主要发展方向。我国目前有3000余万亩的设施蔬菜，其中主要发生的害虫为粉虱(温室白粉虱和烟粉虱)、蚜虫(瓜蚜)、蓟马，常年危害产量损失在30％以上。目前防治害虫的主要手段是化学防治，如喷洒有机磷(乐果、毒死蜱等)和菊酯类化学农药，这些农药的大量使用，造成了农产品农药残留严重超标和农田环境严重污染，迫切需要发展生物防治来替代和局部替代化学农药的使用。对于温室刺吸式口器的小型害虫(如粉虱、蚜虫、蓟马)，它们繁殖力强，抗药性强，更是需要生物防治。本发明针对这一农业生产的客观需求，研究发现一株高效生防菌，进而研究了该菌株的相应制剂和应用技术。

发明内容

本发明从我国福建罹病的粉虱体中分离筛选得到一株对温室粉虱高效寄生的真菌菌株；本发明提供该菌株的鉴定特征和生物学特性；在明确菌株高效寄生作用的基础上，还提供了该菌株相应制剂的配制技术以及防治应用方法。本发明内容对农业无公害生产和绿色食品生产具有积极的促进作用。

本发明的技术方案如下：

本发明所提供的菌株，其特征在于：该菌株为蜡蚧轮枝菌Verticillium lecanii CA190404，2004年4月7日保存于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)”，其保藏号为CGMCC1126。

菌株形态鉴定特征

菌株在麦芽糖琼脂、燕麦琼脂及马铃薯琼脂培养基上培养7天后菌落白色至淡黄色，薄絮状，背面无色至淡黄色。分生孢子梗不发达，似营养菌丝，其上一般有3-4个轮生的瓶梗，瓶梗纤细，基部1.4-1.7μM，长10-14μM，端尖，白色。分生孢子椭圆形，两端圆，白色至淡黄色，单生，有黏液，在瓶梗顶部聚集成头状，3-4.5×2.5-3.5μM。

菌株的生物学特征

菌株孢子萌发最佳温度为24-25℃，湿度为85％-100％，pH值为7。菌丝生长最佳温度为23-24℃，最佳pH值为6-7，菌株生长最佳C/N比为20:1，最佳碳源浓度为1mol/L；菌株最佳碳源为蔗糖、可溶性淀粉、麦芽糖、纤维二糖、海藻糖；最佳氮源为大豆蛋白胨、牛肉蛋白胨、酵母粉。菌株产孢最佳温度为24-25℃，谷氨酸、苯丙氨酸、鸟嘌呤对菌株产孢有显著的促进作用。

菌株制剂及其对害虫的防治作用

菌株的固体制剂，其组成含量比例(重量比)为：蜡蚧轮枝菌(纯孢粉，含孢子90％以上)8％，液体石蜡4％、葡萄糖3％、木质素磺酸钠4％，吐温100号3％，淀粉10-12％，硅藻土(68％-66％)加到100％，混合均匀而成。田间应用时将该制剂加水800-1000稀释，其悬浮液中孢子浓度为10⁶-10⁷个/ml，均匀喷洒在有害虫(粉虱、蚜虫、蓟马)的植物表面，在环境相对湿度85％以上中持续48小时后，对粉虱6-7天的防治效果可达到85％以上，防治瓜蚜的效果可达到85％以上，防治蓟马的效果可达60％-75％，可以有效控制害虫的危害，可用于无公害蔬菜和绿色食品蔬菜的生产。

具体实施方式

实施例1：菌株分生孢子的大量培养与提取

将长期保存的该菌株的试管菌种用马铃薯琼脂培养基(在常规配方基础上添加0.5％的酵母粉)转接活化3次，将固体平板上培养6-7天的分生孢子用无菌水打下，然后接到摇瓶上培养，接种量为5％，180转/分，24℃摇床培养60小时，将其作为种子接到含水量75-80％的大米饭粒上(大米预先加水，泡6小时，分装到微波炉塑料袋中加热，每500克大米1000W微波炉中热7-8分钟，制成七成熟)，24℃无菌袋内培养4-5天，开袋培养1.5-2天。结束培养后，在30-35℃的烘房中烘干3-4天，然后将结团的烘干物打碎，过筛(400目)，即可得到纯孢粉(含孢子90％以上)。这种纯孢粉可用于配制田间应用的制剂，用于防治害虫。

实施例2：防治蔬菜温室白粉虱(Trialeurodes vaporariorum)