[发明专利]从动物组织中提取病毒基因组RNA的方法无效
| 申请号： | 200710185356.7 | 申请日： | 2007-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN101220072A | 公开（公告）日： | 2008-07-16 |
| 发明（设计）人： | 赵宝华;宋杰;黄文娟 | 申请（专利权）人： | 河北师范大学 |
| 主分类号： | C07H21/02 | 分类号： | C07H21/02;C07H1/08 |
| 代理公司： | 石家庄科诚专利事务所 | 代理人： | 刘谟培 |
| 地址： | 050016河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 动物 组织 提取 病毒 基因组 rna 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种从动物组织中提取病毒基因组RNA的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)组织匀浆
取病变组织剪碎后加入无菌水，匀浆器内高速匀浆至单细胞悬液；
(2)细胞裂解、病毒释放
将单细胞悬液反复冻融、超声破碎，使细胞裂解、病毒释放；
(3)离心分离
将上述相处理液低温下，离心分离收集病毒沉淀；
(4)RNA提取
向沉淀物中加入RNAiso Reagent试剂，重悬，分离后提取得到RNA。
2.按权利要求1所述的从动物组织中提取病毒基因组RNA的方法，其特征在于：步骤(3)中，控制温度4℃，首先低速离心分离去除宿主细胞物质，然后再高速离心分离收集病毒沉淀。
3.按权利要求2所述的从动物组织中提取病毒基因组RNA的方法，其特征在于：步骤(3)中，8000g低速离心分离15min，35000g高速离心分离3h。
4.按权利要求1所述的从动物组织中提取病毒基因组RNA的方法，其特征在于：步骤(2)中，反复冻融3次、300W超声破碎2min。
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