[发明专利]兔抗大沙鼠免疫血清

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物制品，特别是兔抗大沙鼠免疫血清。

背景技术

自1877年R.克劳斯发现血清学反应，1899年J.博尔代发现免疫学交叉反应以来，利用这种抗原与抗体的特异性免疫学反应进行疾病的诊断、生物鉴定的技术方法得到广泛的应用和飞速发展，但这一技术方法需要开发研制特异性的抗血清或特异性的抗体，以此作为特异性诊断试剂。同时，这种制剂可作为进行进一步免疫学检测，如酶标记、荧光标记、分子标记等的基础制剂。目前国内和国际多家生物制剂公司开发出了较多的常规科学试验和医学检测用特异性免疫血清，如羊抗人免疫血清、羊抗鼠免疫血清、兔抗人免疫血清、兔抗鼠免疫血清等等。由于免疫学反应是一种种属特异性非常高的特异性反应，因此，上述这些市售的免疫血清制剂均有非常强的针对性，羊抗人或兔抗人的免疫血清主要针对人类感染疾病的研究、诊断等，而羊抗鼠或兔抗鼠的免疫血清则主要用于实验鼠类的疾病感染、模型和生物鉴定等的科学研究和实验室诊断。如果用上述制剂检测和研究其它物种，则会由于种属差异性的原因造成免疫交叉反应和非特异性等问题，引起研究结果和检测结果的偏差，如假阳性或假阴性等。鉴于此，对于大沙鼠感染性疾病的研究就需要专门研制相应的抗血清。

发明内容

本发明的目的在于提供一种兔抗大沙鼠免疫血清，用于大沙鼠感染性疾病、病原体和非致病性微生物感染的研究和实验室的特异性检测诊断，使用方便。

本发明的目的是这样实现的：一种兔抗大沙鼠免疫血清，它是由下列两个工艺步骤制得的：a、大沙鼠血清IgG抗原的制备：(1)采集大沙鼠血液，静置待血清析出后以至少2000转/分钟的离心速度用离心机分离获取大沙鼠血清；(2)再以至少5000转/分钟的离心速度用离心机去除步骤(1)大沙鼠血清中的颗粒状物；(3)将上述离心后的血清与等量生理盐水混合，逐滴加入饱合硫酸铵溶液至20％浓度，滴加时边加边摇，然后将其放置于4℃的冰箱内保持至少20分钟，再以至少8000转/分钟的离心速度进行离心操作5-15分钟，去除血清中的杂物及纤维蛋白；(4)取上清液再补加饱合硫酸铵至35％浓度，然后将其放置于4℃的冰箱内保持至少20分钟，再以至少8000转/分钟的离心速度进行离心操作5-15分钟，弃上清液留取沉淀物，即为大沙鼠血清中的粗提IgG；(5)将所述沉淀物重新用生理盐水溶解，重复(3)和(4)步骤进行进一步纯化；(6)将纯化后的大沙鼠IgG用生理盐水溶解后，装入透析袋用0.01M pH7.2 PBS进行透析过夜，透析后获得的大沙鼠IgG抗原置于-20℃的冰箱内备用；b、兔抗大沙鼠IgG抗体的制备：(1)选取两只各2.5公斤左右的健康新西兰实验兔备用；(2)用1ml注射器吸取由a步骤制得的大沙鼠IgG抗原1ml，沿兔背脊柱两侧行皮下多点注射进行初次免疫；(3)间隔半个月后进行第二次免疫，免疫量及方法同上；(4)然后再每隔15天免疫一次，剂量及方法同上，共免疫四次；(5)末次免疫15天后，由股静脉采集实验兔血液1mL，分离血清进行抗体检测，检测方法为免疫环状沉淀试验和红细胞凝集试验；(6)当抗体滴度已达到环状沉淀试验要求的1∶32时，则对实验兔进行腹腔加强免疫三天后进行颈动脉采血；(7)采集的血液，静置待血清析出后至少2000转/分钟的离心速度进行离心操作即可获得兔抗大沙鼠免疫血清。

大沙鼠是新疆平原荒漠地区分布最广、数量最多的鼠类之一。不仅对野生植被和农作物具有巨大的破坏性，而且其自身携带和传播的一些动物性疾病的对广大人民群众的生命健康构成巨大威胁，如鼠疫、寄生病等。本发明兔抗大沙鼠免疫血清将对研究大沙鼠感染性疾病、病原体和非致病性微生物起到重要的作用。为制定有效的疾病预防措施提供科学依据。采用本发明工艺步骤制得的兔抗大沙鼠免疫血清可以用于大沙鼠感染性疾病、病原体和非致病性微生物感染的研究和实验室的特异性检测诊断，也可用于以大沙鼠为模型的疾病研究，并可作为与其它鼠种的进行特异性生物鉴定和鉴别诊断的免疫血清制剂。同时，本制剂可作为进一步制备酶标记免疫血清、荧光标记免疫血清制剂的基础制剂，广泛用于大沙鼠、相关疾病和生物鉴别的研究和生产活动中。本发明工艺步骤简单，易于制造，使用方便。

具体实施方式

一种兔抗大沙鼠免疫血清，它是由下列两个工艺步骤制得的：

a、大沙鼠血清IgG抗原的制备：

(1)采集大沙鼠血液，静置待血清析出后以4000转/分钟的离心速度用离心机分离获取大沙鼠血清；

(2)再以6000转/分钟的离心速度用离心机去除步骤(1)大沙鼠血清中的颗粒状物；