[发明专利]高致病性猪蓝耳病病毒重组质粒和遗传工程疫苗有效
| 申请号： | 200710172364.8 | 申请日： | 2007-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN101205539A | 公开（公告）日： | 2008-06-25 |
| 发明（设计）人： | 袁世山;吕健;李祥健;张建武;余丹丹;孙志;高飞;韦祖樟;庄金山;谭涛;郑海红;谭菲菲;刘长龙;陆嘉琦;丛雁芳;王小敏;郑浩 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/40 | 分类号： | C12N15/40;C12N15/63;C12N7/01;C12N7/04;A61K48/00;A61P31/14 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 缪利明 |
| 地址： | 200232上*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 致病性 猪蓝耳病 病毒 重组 质粒 遗传工程 疫苗 | ||
1.一种高致病性猪蓝耳病病毒重组质粒的构建方法，其特征在于包括以下步骤：根据蓝耳病病毒基因相对保守区的序列设计多对引物，利用高致病性猪蓝耳病病毒cDNA为模板，分段扩增蓝耳病病毒基因序列，然后将扩增出的序列依次连接到合适的载体中，获得猪蓝耳病病毒重组质粒。
2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述蓝耳病病毒基因分为5段扩增，序列分别如SEQ ID NO：1-5所示。
3.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述载体为pBlueScript II SK(+)。
4.如权利要求1-3中任一项所述重组质粒构建的遗传工程疫苗，其特征在于，所述疫苗为编码结构蛋白的序列和3’UTR基因被所述重组质粒的相应的编码结构蛋白的序列以及3’UTR基因所替代的弱毒疫苗株。
5.如权利要求4所述的遗传工程疫苗，其特征在于，所述弱毒疫苗株为pAPRRS。
6.如权利要求4所述的遗传工程疫苗，其特征在于，所述结构蛋白为ORF4、ORF5、ORF6、ORF7或ORF5、ORF6、ORF7所编码的结构蛋白。
7.如权利要求6所述的遗传工程疫苗，其特征在于，所述ORF4的序列如SEQ ID NO：6的位点13151-13687所示，ORF5的序列如SEQ ID NO：6的位点13698-14300所示。
8.如权利要求4所述的遗传工程疫苗，其特征在于，所述3’UTR序列如SEQ ID NO：6的位点15171-15373所示。
9.如权利要求4所述的遗传工程疫苗，其特征在于，所述疫苗序列选自SEQ IDNO：11-13中任一序列。
10.如权利要求4-9中任一项所述的疫苗的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
A)扩增出重组质粒的结构蛋白基因；
B)酶切扩增出的结构蛋白基因和弱毒疫苗株；
C)连接酶切后的结构蛋白基因和弱毒疫苗株。
11.如权利要求10所述的构建方法，其特征在于，所述方法还包括转化宿主菌和阳性克隆的筛选步骤。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院上海兽医研究所，未经中国农业科学院上海兽医研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200710172364.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
