[发明专利]一种激光多模式微体积样品分析方法及所用装置

权利要求书

1.一种激光多模式微体积样品分析方法，其特征在于包括以下步骤：1)将毛细管电泳仪中去除外保护层的一段毛细管作为微检测池(10)，将毛细管(17)的两端分别浸没于缓冲溶液承载池(19)和缓冲溶液承载池(21)的缓冲溶液液面下，直流高压电源(18)的正负极分别通过圆柱形铂电极分别浸没于缓冲溶液承载池(19)和缓冲溶液承载池(21)的缓冲溶液液面下，进样时用装有样品的样品池(20)取代其中一个缓冲溶液承载池，然后利用电驱动或者压差进行进样操作，进样完毕后将原缓冲溶液承载池还原至原本位置，然后打开直流高压电源(18)输出直流高压，使毛细管电泳仪通电，在直流高压电源的作用下，不同的微体积样品电泳趟度不同，导致不同的微体积样品将以不同速度向毛细管(17)运动，不同的化学物质依次通过被剥离外防护层的毛细管区域即微检测池(10)；

2)泵浦激光器(1)射出的激光光束经过斩光器(2)和偏振片(3)的调制后，在分束器(4)处与热透镜检测激光器(5)所射出的激光光束耦合成同一激光束，所得的耦合光束在透过分束器(6)后被聚焦透镜(9)聚焦于微检测池(10)的中心处，透过微体积样品样品池(20)的耦合激光束由高通滤光片(11)滤去泵浦激光束，再由光电检测器件(12)进行检测得到激光热透镜检测模式原始信号；微体积样品由泵浦激光所激发的荧光由显微物镜(13)所收集，经过光阑(14)和带通滤光片(15)的调制后，由光电检测器件(16)进行检测得到激光诱导荧光检测模式原始信号；微体积样品检测池处由于散射所产生的回射散射光经分束器(6)反射至垂直方向并产生肉眼可见的规整干涉条纹，经光阑(7)的调制后由光电检测器件(8)进行检测得到激光回射干涉检测原始信号，通过计算机附带的数字采集卡对激光热透镜检测模式原始信号、激光诱导荧光检测信号和激光回射干涉检测信号进行采集，得到实时变化的数据图线，根据实时变化的数据图线实现对微体积样品的分析。

2.根据权利要求1所述的激光多模式微体积样品分析方法，其特征在于：光电检测器件(8)和光电检测器件(12)为光二极管、光电倍增管、光电耦合器件或二极管阵列，光电检测器件(16)为光电倍增管、光电耦合器件或二极管阵列。

3.激光多模式微体积样品分析所用装置，至少包括光学调制检测部分、毛细管电泳仪和信号采集处理部分，其特征在于：光学检测调制部分的泵浦激光器(1)、斩光器(2)、偏振片(3)、分束器(4)、分束器(6)、聚焦透镜(9)、微检测池(10)、高通滤光片(11)、光电检测器件(12)依次排列，且中心均位于同一水平线，分束器(4)垂直方向设有热透镜检测激光器(5)，分束器(6)垂直方向依次设有光阑(7)和光电检测器件(8)，微检测池(10)垂直方向依次设有显微物镜(13)、光阑(14)、带通滤光片(15)和光电检测器件(16)，其中微检测池(10)为毛细管电泳仪中去除外保护层的一段毛细管；信号采集处理部分中的计算机(26)与光电检测器件(8)之间设有锁相放大器(23)，计算机(26)和光电检测器件(12)之间设有锁相放大器(24)，计算机(26)与光电检测器件(16)之间设有锁相放大器(25)，斩光器(2)上设有斩光器控制器(22)，且斩光器控制器(22)通过锁相放大器(19)、锁相放大器(24)和锁相放大器(25)与计算机(21)连接。

4.根据权利要求3所述的激光多模式微体积样品分析所用装置，其特征在于：检测激光热透镜检测模式原始信号的光电检测器件(12)与毛细管电泳仪中的样品池(20)之间的距离需大于或等于150毫米。

5.根据权利要求3所述的激光多模式微体积样品分析所用装置，其特征在于：检测激光诱导荧光检测模式原始信号的光电检测器件(16)和微检测池(10)分别位于显微物镜(13)的焦平面上。

6.根据权利要求3所述的激光多模式微体积样品分析所用装置，其特征在于：微检测池(10)由光透过率高的材质如玻璃、有机玻璃、石英等制成，其形状为立方体或圆柱体，且内径大于75微米。

7.根据权利要求3所述的激光多模式微体积样品分析所用装置，其特征在于：检测激光回射干涉检测原始信号的光电检测器件(8)和检测激光热透镜检测模式原始信号光电检测器件(12)为光二极管、光电倍增管、光电耦合器件或二极管阵列；检测激光诱导荧光检测模式原始信号的光电检测器件(16)为光电倍增管、光电耦合器件或二极管阵列。