[发明专利]浆果类花药再生植株的诱导基

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养基的改进，尤其涉及浆果类花药再生植株的诱导培养基的配方改进，属于生物工程技术领域。

背景技术

目前，浆果类多是采用花药培养获得脱毒苗和单倍体植株，但浆果类花药愈伤组织再生植株的诱导率较低，最高仅达到20％左右。严重影响了浆果类生产脱毒种苗的应用和生物技术育种工作的进程。

传统的花药培养均是采用MS和F培养基，MS与F培养基无机盐浓度较高，成本较高；且激素的浓度也不合理，诱导分化率较低。

发明内容

本发明就是针对上述问题，提供一种诱导分化率高的浆果类花药再生植株诱导基。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案，本发明的诱导基包括无机盐和激素，所述的无机盐的大量元素包括：NH₄NO₃ 300-450mg/L，NH₄H₂PO₄80-150mg/L，KNO₃ 500-650mg/L，CaCl₂·2H₂O 80-100mg/L，MgSO₄·7H₂O200-300mg/L，Ca(NO₃)₂·4H₂O 200-300mg/L，EDTA-FE 10-30mg/L；

所述的无机盐的微量元素包括：KI 0.3-1.2mg/L，MnSO₄·H₂O 10-30mg/L，H₃BO₃ 5-20mg/L，ZnSO₄·7H₂O 5-10mg/L，NaMoO₄.2H₂O 0.1-0.5mg/L，CuSO₄·SH₂O 0.5-1.0mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.5-1.0mg/L；

所述激素包括：6-苄基氨基嘌呤BA 0.2-0.8mg/L，赤霉酸GA₃ 0.5-1.5mg/L，二，四-滴酊脂2-4D 0.2-0.8mg/L，青霉素G 20-80mg/L，吲哚丁酸IBA0.2-1.0mg/L。

本发明的有益效果

由于本发明的无机盐含量是1575.1-1771.5mg/L，最适浓度1742mg/L与MS培养基所含无机盐浓度比为1：2.6，与F培养基所含无机盐浓度比为1：1.6。

研究结果表明：合理降低培养基无机盐含量有利于分化培养，高浓度无机盐抑制愈伤组织植株的再生，尤其是磷镁含量与比例作用显著，含量越高比值超大其抑制作用越大；因此，利用本发明进行浆果类花药培养，再生植株诱导率达90％以上，可比MS培养基与F培养基节约投入成本1.6—2.6倍；花粉单核期培养诱导产生二倍体植株与单倍体植株，试验调查显示适宜浓度的GA3与2.4—D可有效促进植株分化，诱导作用明显；微量元素硼钴铜含量的增加可促进花粉管伸长，形成单格体植株，且植株难壮，成活率高。

愈伤组织分化产生的二倍体植株可进一步扩繁成无毒种苗用于生产，提高浆果类的产量与品质；其产生的单倍体植株通过秋水仙素加倍成为浆果类育种的纯合材料，缩短了育种周期。

具体实施方式

实施例1：

诱导基包括无机盐和激素，所述的无机盐的大量元素包括：NH₄NO₃360mg/L，NH₄H₂PO₄ 115mg/L，KNO₃ 560mg/L，CaCl₂·2H₂O 90mg/L，MgSO₄·7H₂O 240mg/L，Ca(NO₃)₂·4H₂O 240mg/L，EDTA-FE 22mg/L；