[发明专利]一种益生菌乳制品中嗜酸乳杆菌的检测方法

权利要求书

1.一种益生菌乳制品中嗜酸乳杆菌的检测方法，其特征在于：具体的检测步骤如下：

1)取适量冻干菌种无菌操作溶于无菌温水中，混匀制备得到混合菌悬液；

2)用胰化胨溶液将样品进行稀释，得到稀释混合菌悬液；

3)将稀释混合菌悬液接种到培养基上；

4)在37℃厌氧培养箱中，培养70-72小时；

5)用常规方法测得酪乳杆菌菌落；

6)在培养基加入氯洁霉素抗生素培养基上分离出的菌种，镜检细菌形状为杆状，过氧化氢酶阴性，七叶苷、纤维二糖、麦芽糖和蔗糖呈阳性，甘露醇和山梨醇呈阴性的菌种即为嗜酸乳杆菌；即可判断嗜酸乳杆菌的存在。

2.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的检测方法，其特征在于：

其中所述的步骤2的稀释方法如下：

1)无菌操作称取25g(ml)均匀样品(或混合菌悬液)，于225ml胰化胨溶液中，制成10-1的均匀稀释液；

2)无菌操作吸取10-1的稀释液1ml，于9ml胰化胨溶液中，制成10-2的均匀稀释液；

3)无菌操作吸取10-2的稀释液1ml，于9ml胰化胨溶液中，制成10-3的均匀稀释液。

3.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的检测方法，其特征在于：

步骤3中的培养方法如下：

1)选择2-3个合适稀释度，分别吸取1ml于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿；

2)每个平皿倒入适量50℃的选择性培养基，转动平皿使之混匀，并做空白对照。

4.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的检测方法，其特征在于：

所述的培养基的组成及制备方法如下：

培养基的组织成分：

组成成重量(g)

牛肉蛋白粉10

鱼肉汁10

酵母浸出汁粉5

葡萄糖20

醋酸钠5

柠檬酸二铵2

吐温800.1

硫酸镁0.58

硫酸锰0.28

蒸溜水1000ml

灭菌后用乙酸调节PH到5.4。

5.如权利要求1或4所述的嗜酸乳杆菌的检测方法，其特征在于：所述的氯洁霉素培养基溶液的制备方法如下：

首先制备氯洁霉素溶液：

组成：氯洁霉素0.01g，蒸馏水200ml，

制法：溶液分瓶装；过滤灭菌(0.45μm过滤器)，

保藏：4℃下保藏一个月；

然后制备氯洁霉素培养基：

准备：在使用之前，0.2％的氯洁霉素溶液在无菌条件下加入培养基中。

6.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的检测方法，其特征在于：

所述的胰化胨溶液组成及制备方法如下：

组成：胰蛋白胨1g，NaCl 8.5g，蒸馏水1000ml；

制法：溶液分瓶装，数量小于100毫升的，用灭菌锅121℃；

灭菌15分钟，数量大于100毫升的，121℃灭菌20分钟。