[发明专利]双(5－甲酰基糠基)醚的分离、纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种醚的制备方法，尤其涉及一种通过植物组织培养的方法从所培养的仙客来愈伤组织的胞外液体中分离、纯化双(5-甲酰基糠基)醚的方法，属于植物组织培养领域。

背景技术

仙客来(Cyclamen persicum Mill)亦称“兔耳花”、“兔子花”，属报春花科(primulaceae)仙客来属多年生草本植物，球茎扁球形，叶丛生，花向上反卷，形似兔耳，有红、白、深红等花色。原产希腊、叙利亚。目前在我国一般作温室栽培，是北方花卉产业的重要种类之一。仙客来除有观赏价值外，其球茎有多种生物学活性，在土耳其民间药方有抗生育、促进子宫收缩、通经活血等功能。仙客来球茎中的化学成分除含有淀粉、胶质等外，主要含有仙客来皂苷。皂苷类物质具有广泛的生物活性，如抗菌、抗心肌缺氧、抗肿瘤、免疫调节、作为重组蛋白亚基抗病毒疫苗的佐剂、抗突变与基因保护、促分化、杀精子、治疗高脂症、在实验性肝损伤中有保肝作用、以及可以作为抗氧化剂等，具有很大的潜在药用价值而成为近年来海洋药物研究的热点之一。

仙客来球茎有多种生物学活性，新鲜球茎制成的一种药膏(ointment ofarthainta)，可用于驱除蠕虫。使用时涂抹在儿童的肚脐或成人的腹部促使呕吐，或涂在膀胱部位增加尿液的排除。仙客来的球茎在土耳其民间药方中用于抗生育、通经活血等。误食其球茎会表现一定的中毒症状，可引发肠炎、盗汗、耳鸣、甚至痉挛。目前对仙客来中的活性成分的研究较少。相关文献仅有1996年，Ihs Calis等研究的小花仙客来(Cyclamen coum Miller)和木拉贝仙客来(Cyclamenmirabile Hidebr.)两个野生种球茎中的化学成分的报道。Ihs Calis等从木拉贝仙客来球茎分离得到6个三萜皂苷化合物，分别是cyclaminorin、脱葡萄糖仙客来皂苷(deglucocyclamin)、小花仙客来皂苷(cyclacoumin)、仙客来皂苷(cyclamin)、异仙客来皂苷(isocyclamin)、木拉贝皂苷(mirabilin)。小花仙客来的球茎中分离得到4个三萜皂苷类化合物，为cyclaminorin、脱葡萄糖仙客来皂苷(deglucocyclamin)、小花仙客来皂苷(cyclacoumin)、木拉贝内酯(mirabilinlactone)。

同时研究其生物活性发现，此类物质有促进试验小鼠子宫收缩的功能，而且有明显的抗真菌活性和相对较弱的抗细菌活性。同样的皂苷脱葡萄糖仙客来皂苷(deglucocyclamin)据报道在紫金牛科的百两金的根中也含有，此植物的根被用作泰国的传统药物，用于治疗月经疼痛，有通络活血的功效。据报道百两金同属植物朱砂根的根中也分离得到了两种新的皂苷，有子宫收缩的功能。朱砂根的根在中国用于中药药方，主要用来治疗呼吸道感染及月经不调等症状。研究显示了无论是来自仙客来的球茎还是朱砂根的皂苷在化学结构上有很大的相似性，同时这种相似性还表现在其传统的药物使用方法上。

目前双(5-甲酰基糠基)醚仅从月腺大戟、西南忍冬等植物体内被分离获得，且报道该化合物对结核菌有一定的抑制活性。

利用组织培养方法生产药用成分，已渐渐成为药物生产的新方向之一。它对探讨和阐明药用植物生理、遗传和活性成分生物合成等一系列理论问题也能提供一定的实验依据。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种新的双(5-甲酰基糠基)醚的分离、纯化方法。

本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：

一种从仙客来中分离、纯化双(5-甲酰基糠基)醚的方法，包括以下步骤：

(1)按照常规的植物组织培养方法培养得到仙客来愈伤组织的胞外培养液；

(2)将步骤(1)所获得的仙客来愈伤组织的胞外培养液减压浓缩至膏状物，烘干得浸膏，备用；

(3)将步骤(2)所获得的浸膏酸解，得酸解液；

(4)酸解液过滤，滤液用氯仿萃取1-3次，合并氯仿萃取液，备用；滤渣烘干包扎，用氯仿回流提取，得氯仿提取液；将氯仿萃取液和氯仿提取液合并，得氯仿粗提物；将氯仿粗提物浓缩至干用乙醚溶出，得乙醚溶解物；

(6)乙醚溶解物减压至干，析晶，氯仿溶解转出，重结晶，即得。