[发明专利]能防治猪腹泻的免疫球蛋白复合剂的生产技术

说明书

(一)技术领域

本发明涉及兽药与饲料添加剂领域，具体是指特效防治猪腹泻中草药免疫球蛋白复合制剂的生产方法。

本发明适用于猪腹泻的预防和治疗，同时也适用于各种家禽、家畜等动物腹泻疾病的防治。

(二)背景技术

仔猪腹泻是由猪致病性大肠杆菌、魏氏梭菌和轮状病毒、传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒以及产气荚膜梭菌等引起的一种常见传染病，包括猪传染性胃肠炎、流行性腹泻、猪轮状病毒病、猪繁殖呼吸综合症、猪瘟、伪狂犬病和圆环病毒性肠炎等，具有发病急、传播快、死亡率高等特点，严重危害养猪业的发展。

常见的仔猪胃肠道疾病有仔猪白痢、仔猪黄痢、仔猪副伤寒、传染性胃肠炎等。仔猪黄、白痢主要是由埃希氏大肠杆菌引起，一般吮乳仔猪发病率较高，同窝仔猪发病率可达80％，其中仔猪白痢的死亡率较低，而仔猪黄痢的死亡率很高，有时甚至会全窝死亡。产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia colt，ETEC)是引起新生和断奶仔猪腹泻的主要致病菌之一(Yokoyam等，1992)。初生仔猪和早期断奶仔猪自身免疫功能的不成熟以及早期断奶应激引起的免疫抑制，是造成仔猪对ETEC敏感性增高、抗病力下降，并引发ETEC感染性腹泻的主要因素。

长期以来，仔猪腹泻的防治主要依赖于抗菌药物、大肠杆菌多价苗和基因工程疫苗。然而，抗生素在动物体内会导致药物残留和产生抗药性；用疫苗免疫母猪，虽可提高母乳中免疫球蛋白含量，但母源免疫球蛋白持续时间短，不足以保护仔猪整个生长阶段不致病；口服高免动物血清虽能有效防治该病，但成本较高很难在生产中推广应用。

中草药是纯天然制剂，毒副作用小，不存在耐药性及药物残留问题，加之随着人们生活水平的不断提高，动物性食品的安全性越来越引起社会的关注。中草药添加剂在改善仔猪特异性免疫功能的同时，还可以刺激仔猪非特异性免疫功能。研究表明，中草药添加剂能显著提高断奶仔猪肠道中蛋白酶的活性，从而一方画提高蛋白质吸收率，促进组织器官和免疫器官的生长发育；另一方面，促进蛋白质的消化吸收，不致被大肠段微生物过度发酵，防止了腹泻的发生。

卵黄免疫球蛋白(Egg Yolk Immunoglobulin，卵黄免疫球蛋白)，卵黄免疫球蛋白具有增强机体抗菌、免疫功能，采用生物技术从产蛋鸡卵黄中制备特异性多克隆免疫球蛋白，具有成本低，产量高的特点。卵黄免疫球蛋白能够凝聚、吞噬和中和细菌及毒素成分；增强免疫系统功能，预防消化道等疾病，促进营养吸收。用于动物的保健和疾病治疗等。预防仔猪大肠杆菌性腹泻卵黄免疫球蛋白对宿主特异性菌毛抗原有强烈的亲和力，能够阻断或降低宿主特异性菌毛与仔猪小肠上皮的结合，使ETEC不能在小肠定居繁殖，从而阻断了大肠杆菌产生肠毒素，防止和减少仔猪腹泻的发生。

抗生素作为控制细菌感染的有效药物广泛应用于生产中，但抗生素的长期使用引起的耐药性问题和生产中超量使用抗生素的现象越来越突出，但控制效果却并不乐观。抗生素替代品的研究成为畜牧业发展的迫切需求。研制新型的制剂，在防治仔猪腹泻疾病方面，做到治标与治本结合，加快养猪业的发展，实现猪肉产品的绿色无害化，成为人们关注的焦点。

(三)发明内容

本发明的目的在于，提出防治猪腹泻中草药免疫球蛋白复合制剂的制备方法，在中草药基料基础上添加特异性卵黄免疫球蛋白而形成的，本发明综合了中草药与免疫球蛋白的优点，是一种新型的抗生素替代品，可以替代抗生素，解决了传统用抗生素治疗猪腹泻产生耐药性问题，实现畜禽产品的绿色无害化。

本发明的工艺如下：

1.卵黄免疫球蛋白的制备方法

1.1鸡蛋免疫制备：选择健康产蛋母鸡，用市购或自制的大肠杆菌多价疫苗(如K88、K99、987P、F41多价疫苗)对蛋鸡胸部肌肉分别多点注射，0.5mL/只，每周免疫一次，三次免疫后，免疫球蛋白水平达到高效价后，收集鸡蛋。

1.2卵黄免疫球蛋白提取方法——乙酸-乙酸钠缓冲液方法(一)